雏鹅新型病毒性肠炎病毒强毒致鸭胚成纤维细胞凋亡初探.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 凋亡现象，但关于NGVEViJl起宿主细胞凋亡以及凋亡细胞的形态学变化，目前尚无资料报道。本研 究通过三种不同的检测手段，初步探讨NGVEV感染并诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)凋亡的发生和凋 亡细胞的特征性变化，以期进一步了解雏鹅新型病毒性肠炎病毒与宿主细胞之间的相互作用关系， 为阐明NGⅥⅣ的感染和致病机理提供科学数据。 l材料和方法 1．1鸭胚成纤维细胞 由lO日龄四川麻鸭胚制成。将胚体去头、腿、翅、内脏后剪成Imm3的小块，经胰酶消化后用含 10％d、牛血清的MEM生长营养液培养，于37．5℃生长24h后成为致密的细胞单层。 1．2雏鹅新型病毒性肠炎病毒强毒 适应DEF的NGVEV细胞毒，由四川农业大学禽病防治研究中心分离、鉴定、保存和提供。 1．3H．E染色法样品的制备和观察 2个，次。同时，设未感染NGVEV的龟片培养的DEF细胞作为对照组，与试验组相同操作。试验组 和对照组均按常规染色法：①将飞片从细胞瓶中取出，预冷的PBS清洗3次，4％多聚甲醛固定3h。 ⑥梯度脱水。⑦透明。⑥光学树脂胶封片，37℃烘片，用NiKonS0i可见光显微镜观察并照相。 1．4电镜样品的制备和观察 未感染蚶GⅥⅣ的DEF细胞作为对照组，与试验组相