Dlx2在胚胎间充质细胞成骨分化中的作用.pdfVIP

旦壁医堂 堡墓23卷第 1期 BeiiingJournalof Dlx2在胚胎间充质细胞成骨分化中的作用 郑颖 范志朋 【摘要】 目的 研究Distal—lesshomeobox2(Dlx2)在胚胎间充质细胞成骨分化中的作用。方法 Bmp4诱导 小鼠胚胎间充质细胞系C3H10T1／2细胞体外成骨分化。逆转录病毒转染构建过表达及基因敲除的Dlx2细胞稳定 转染细胞 ，进行 Dlx2获得性及丧失性功能研究。碱性磷酸酶活性实验检测成骨早期分化指标．碱性磷酸酶活性，实 时荧光定量反转录PCR(realtimereversetranscriptionPCR，qRT-PCR)检测成骨分化相关基 因．Sp7转录因子、碱性 磷酸酶和骨钙素的表达。结果 结果显示过表达Dlx2明显增强胚胎间充质细胞 C3H10T1／2的碱性磷酸酶活性。 qRT—PCR结果显示过表达 Dlx2明显促进 Sp7转录因子、碱性磷酸酶和骨钙素的表达。基因敲除 Dlx2明显抑制 C3H10T1／2细胞的碱性磷酸酶活性 ，qRT—PCR结果显示基因敲除Dlx2明显抑制Sp7转录因子、碱性磷酸酶和骨钙 素的表达。结论 Dlx2具有促进胚胎间充质细胞体外成骨分化的功能。 【关键词】 Dlx2；胚胎 ；间充质细胞 ；成骨分化 【中图号】 R321．51 【文献标识码】 A 【文章编号】 1006-673X(2015)01-0025-04 TheroleofDistal-lesshomeobox2intheosteogenicdifferentiationofembryonicmesenchymalceHs ZHENGYing， FANZhi-peng．CapitalMedicalUnive~itySchoolofStomatology，BengKeyLaboratoryof ToothRegenerationand FunctionReconstructoin，Bering100050，China 【Abstract】 Objective ToinvestigatetheroleofDistal—lesshomeobox2(Dlx2)intheosteogenicdifferentiation potential ofembryonicmesenchymalcells．M ethods Smp4 wasusedtoinducetheosteogenicdifferentiation ofmouse embryonicmesenchymal cellline-C3H10T1／2．Thestablecellandover-expressDlx2wereestablishedbyretroviralFlag- Dlx2forGain—of-functionstudy．Retroviral Dlx2 shRNA wasusedtoestbalishthestba lecellandknock·downofDlx2for Loss—of-functionstudy．Theearlymrakerofosteogenicdifferentiation—Alp activitywasdetected by alkaline phosphatase (Alp)activityassay．RealtimeRT-PCRwasappliedtoexaminetheosteogenesisrelatedgenesexpressions，Sp7transcript factor(osterix，Osx)，Alpandosteocalcin(Ocn)．Results Over—expressionofDlx2promotedtheAlpactivitynadthe expressionsofOSX．AlpandOcninC3H10T1／2cells．Knock．downofDlx2inhibitedtheAlpactivitynadtheexpressions ofOsx，AlpandOcninC3H10T1／2ceUs．Conclusion Dlx2 enhancedosteogenicdifferentiationpotential ofembryonic mesenchymal cellsinvitro． 【