流式细胞术在药学的研究中的应用.pdfVIP

论文集 志，1994．8(3)：199—202 [29]张今斌，于鹏展，周革非，等海带褐藻多糖硫酸酯的抗氧化活性研究[J]中草药，2003：34(9)：824—826 [30]张海容，郭祀远，李琳，等螺旋藻多糖及其硫酸酯清除羟自由基的活性[J]．华南理工大学学报，2003：31(6)：76—79 [31]刘赛，王春波，于桂英，等藻酸双酯钠调血脂作用的实验研究【j]山东医药工业，1998：17(4)：8-9 ∞2]徐祖洪，李智思，毕爱芳，等．治疗慢性肾衰的海洋新药FPS的研究[J]．中国海洋物，1998：17(4)：41—45 流式细胞术在药学研究中的应用 周蓓 (深圳市第六人民医院中心实验室，深圳) 流式细胞术(FCM)是70年代初发展起来的一项高新技术，80年代开始从基础研究发展到临床医学研 cytometer， 究及疾病的诊断和治疗监测。我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪。流式细胞仪(flow FCM)是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗 体技术为一体的新型高科技仪器。它是对流动液体中排列成单列的细胞或生物颗粒进行多参数的、快速的 定量分析和所需细胞分选的技术。在医学研究领域中，流式细胞仪能够快速分析单个细胞的多种特性，它既 可以定性也可以定量，在免疫血液学、肿瘤学、l㈤求检验学和基础科学如细胞凋亡、细胞抗药性、癌和抗 癌基因、钙离子测量、细胞分选等及防治AIDS病研究方面都有成熟的应用。 1 流式细胞仪工作原理”4 出一系列科研型和临床型的流式细胞仪，并研制生产了FCM所用的各种单克隆抗体和荧光试剂。流式细胞仪 的工作原理是当待测标本被制成单细胞悬液。经染色后进入流动室，流动室充满流动的鞘液，鞘液压力与样 品流压力是不同的，当两者的压力差异达到一定程度时，鞘液裹挟着的样品流中细胞排成单列逐个经过激 光聚焦区。若将细胞中感兴趣的部分特异性地标上荧光染料，那么这些染料将在细胞通过激光检测区时受 激发产生特定波长的荧光，通过一系列信号转换、放大、数字化处理、就可以在计算机上直观地统计染上 各种荧光染料的细胞各自的百分率”。“。选择不同的单克隆抗体及荧光染料，可以利用流式细胞仪同时测定 一个细胞上的多个不同的特征，如果对具有某种特征的细胞有兴趣，还可以利用流式的分选功能将其分选 出来，以便进一步培养、研究。FCM近几年还被应用于药学的研究如多药耐药基因的研究中”。等。 2在中医药学研究中的应用 2．1 流式细胞仪在中医辨证分型中的作用 近年来随着生物技术的不断发展，人们尝试用现代技术和客观指标来反映中医的辨证分型。李冠勇等 量是血瘀型血燥型血热型。说明血小板活化与银屑病血瘀证的发生及发展相关性最密切。 2．2流式细胞仪在中药对癌细胞周期、DNA含量和细胞增殖的影响以及细胞凋亡中的应用 以往的研究已经证明，许多单味中药或复方都有较强的抗癌作用如榄香稀、大蒜等，但药物作用的 部位及分子机理并不清楚。目前应用流式细胞分析技术，可测定药物作用后的癌细胞的DNA相对含量。观 《箩 广州白云山制药股船有限公嗣 2005年抗茵药物研究与临床应用进展学术研讨会 察粹HJ相细胞增殖周划的侈行变化。晰镜玉等…发现人蒜汕使DNA合成j{|j(s)细胞明显减少，由分率F 降，而DNA台成前明(GI)细胞显著增加，说明人蒜油司阻滞癌细胞GI期向s期的进程，造成TGi蝴细 胞上伟积，阻断DNA合成利复制，起到抑制癌细胞的增殖周期的作用。 2 3应用流式细胞仪监测中药治疗前后对细胞表型的影响及临床疗效观察 中药在治疗’熳性痛和提高机体免疫力方面确芊I独特疗效．，若用现代流式细胞技术监测其机体免疫功能 的改变，客观反映疗效，就更有意义。林谦”。等麻州流式细胞术对冠心病心气虚患者外周血’lI淋巴细胞及 其亚群进行了测定，结果表明，冠心病心气虚患者CD3及CD4附陛细胞数量明显低于正常人，而CI)8刚性 细胞数量与正常人比较无明显差异，而服用党参…个川后。可明显提高CD4的数量。 3体外药敏试验 传统的药物敏感试验的方法包括试管肉汤稀释法和琼脂稀释法