雷公藤对光变态反应作用的动物实验的研究.pdfVIP

第四次全国雷公藤学术会议论文汇编，2004年5月，上海 雷公藤对光变态反应作用的动物实验研究 马莉，阎春林，廖康煌，胡跃 (复旦大学附属华山医院皮肤科，上海200040) 摘要：目的研究雷公藤对接触性和系统性光变态反应动物模型的作用及其可能机制。方法用 雷公藤合剂10ml／kg／d灌胃给药，分别对接触性光变态反应小鼠耳肿胀模型和系统性光变态反应小鼠 耳肿胀模型进行药物干预，记录光激发后24、48小时耳肿度，并行耳组织学检查；在接触性光变态反 应小鼠耳肿胀模型中间时进行耳淋巴结细胞计数以及淋巴细胞增殖率和细胞因子分泌情况的测定。结 果两个动物模型中，雷公藤组小鼠均不出现耳肿胀反应，其耳肿度明显低于光变态反应组(p0．叭)， 组织学改变亦未见炎症反应；雷公藤可引起接触性光变态反应小鼠模型耳淋巴结中细胞计数和淋巴细 光变态反应，并可能通过抑制淋巴细胞增殖和刺激IL一4分泌的机制而发挥作用。 关键词：光变态反应；小鼠耳肿胀模型；雷公藤 中药雷公藤具有免疫抑制和抗炎作用，已有研究发现雷公藤可抑制小鼠迟发性免疫应答反应…，但 目前尚未有人就雷公藤对光变态反应作用进行研究。我们利用已建立的接触性光变态反应和系统性光 变态反应的小鼠耳肿胀模型，使用雷公藤进行干预，研究其对光变态反应的作用，为其临床应用于光 变态反应相关疾病的治疗提供理论依据。 材料和方法 一、材料 射光谱在320～380 值为305nm。 光辐射强度为15．6mW／cm2，UVB光辐射强度为4．2mW／cm2。 (3)动物：Balb／c小鼠，雌性，体重18-229，购自中国科学院上海实验动物中心。 司)；以丙酮作为溶媒。 (5)药物：雷公藤合剂(上海实业联合集团药业有限公司)，含19生药／ml。 巴比妥钠注射液；RPMI．1640培养基(GIBCO公司l刀豆球蛋白A(Con Biomol公司)l 日本)；酶标仪(宝特FLx一800，美国)；一70。C低温冰箱(Adrian，美国)。 371 第四次全国雷公藤学术会议论文汇编，2004年5月，上海 方 法 10 45 各小鼠予环磷酰胺腹腔注射；连续3天将20％6．MC涂于小鼠背部脱毛区并予UVAJ／cm2，UVB 10 mJ／cm2照射诱导致敏}第1次诱导结束后7天，将10％6一MC涂于小鼠双侧耳背部并予UVAJ／cmz， UVB45 mJ／cm2照射进行激发。 5 酰胺腹腔注射}连续2天将各小鼠予SN溶液(400mg／kg体重)腹腔注射，随后予UVAJ／cm：、UVB 结束后5天，各小鼠予SN溶液(400 5 mg／kg体重)腹腔注射，随后予UVAJ／cm2照射小鼠双耳进行 激发。 3．雷公藤干预光变态反应动物模型：两种光变态反应模型小鼠，自致敏前1天至激发前1天，每 日用灌胃针予雷公藤合剂10ml／kg体重灌胃给药一次。 4．小鼠耳肿度的测量：各组小鼠双耳照光前用游标卡尺测量基础耳厚度，在光激发后的24、48h用 游标卡尺重复测量各组小鼠的耳厚度，照光后不同时段测得的耳厚度与照光前基础耳厚度的差值即耳 肿度。 5．组织病理：最后一次测量结束后取各组小鼠的耳朵行活组织检查，标本用福尔马林固定，石蜡 包埋切片后，经HE染色；在光镜下观察组织学改变。 6．小鼠局部淋巴结细胞计数：最后一次测量结束后切取各小鼠引流耳朵的双侧耳淋巴结，制备成 单细胞悬液，用0．4％台酚蓝染液染色，在10倍光学显微镜下进行活细胞计数。