肝细胞癌中RHAMM和HIF-1α的表达及临床意义.pdfVIP

临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol 2O14Nov；30(11) ·1297 · 网络 出版时间：2014—11一l914：31 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／lO．13315／j．cnki．cjcep．2014．11．026．html 肝细胞癌中RHAMM和 HIF-1 的表达及临床意义 陈俊林 ，赵 驰 摘要：目的 观察透明质酸介导运动的受体 (receptorforhya— 临床病理因素的关系，为进一步探讨肝癌发病和转移机制提 luronan．mediatedmotility，RHAMM)和缺氧诱导因子-1(hy- 供依据。 poxiainduciblefactor．1et，HIF—let)在人肝细胞癌 (hepatocel- 1 材料与方法 lularcarcinoma，HCC)中的表达及其与临床病理特征的关 系，探讨其在肝癌诊断及预后 中的临床意义。方法 取67 1．1 标本及临床资料 选择近年来有完整临床资料的行肝 例 HCC及相应癌旁组织 ，用 RT-PCR技术检测 RHAMM和 切除术治疗原发性 HCC45例，其中男性34例，女性33例， HIF．1mRNA的表达 ，并分析二者的相关性及与HCC临床 平均年龄 58．5(20～78)岁；Child—Pugh分组 ：A级 4l例 ，B 病理因素的关系。结果 HCC中RHAMM和HIF-letmRNA 级2O例，C级 6例，甲胎蛋 白(AFP)≥300 g／L者52例 ， 表达均高于癌旁组织 ，且呈正相关(P0．001)。二者与患 HBsAg阳性48例。每例取癌组织及距肿瘤边缘5cm以上 者HBsAg阳性、Child—Pug【h分级、血清 AFP水平、微血管侵 的癌旁组织做对照，取得组织立即液氮冷冻，实验前于一80 犯、肿瘤有无包膜、大血管癌栓均无显著相关 (P0．05)；与 ℃冰箱保存。所有患者术前均未接受放疗、化疗及免疫治 癌灶数 目、Edmondson分级、TNM分期均有显著相关性 (P 疗 ，术后经病理确诊为 HCC。按照术前、术中及术后大体标 0．05)。HIF-let表达与肿瘤直径有关 (P0．05)。结论 本、病理诊断报告确定肿瘤临床病理特征。单个肿瘤 32例 ， RHAMM和HIF-1d与 HCC分化、侵袭、转移和预后有关。 多灶35例。肿瘤无包膜或包膜不完整47例；有明确大血管 RHAMM可能参与肿瘤微环境缺氧条件下细胞的转变过程。 癌栓 l7例 (包括门静脉主干或第一分支、下腔静脉及肝静脉 关键词：肝肿瘤；肝细胞癌；RHAMM；HIF-let；RT—PCR 癌栓)；镜下可见微血管侵犯者23例；肿瘤Edmondson分级 ： 中图分类号 ：R735．7 文献标志码：B I+Ⅱ级42例，Ⅲ+Ⅳ级25例。 文章编号：1001—7399(2014)11—1297—03 1．2 RT-PCR检测 Trizol、cDNA逆转录试剂及 SYBR doi：10．13315／j．cnki．cjcep．2014．11．026 MasterMix均购 自Invitrogen公司。用 Primer5．0软件设计 引物 (表 1)。组织总 RNA提取后逆转录为cDNA。PCR反 肝癌的进展、转移涉及与细胞外基质中多种成分间的 应体系20 l：2XSYBRGreenPCRMasterMix10 l，上、下游 相互作用。目前，对于肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma， 引物各 1Ixl，cDNA2txl，RNaseFreeWater6 l。反应条件 ： HCC)与微环境 中复杂网络相互作用的机制尚不清楚。最近 预变性 95oC，5min；变性 ，95℃，30S；退火，58℃，30S，延 Piccioni等 在小鼠HCC模型中的研究发现 ，抑制透明质酸 伸 ，72℃，30S扩增4O个循