兔肝脏局部注射无水乙醇后8-OHdG的表达及意义.pdfVIP

临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol2012Feb；28(2) ·207 · 兔肝脏局部注射无水乙醇后8-OHdG的表达及意义 计柳玉 ，李 航 ，黎乐群 ，杨伟萍 ，赵盛发 ，叶新平 ，罗 虹 摘要：目的 通过观察 DNA氧化损伤标记物 8-OHdG在经 超声引导下经皮注射无水乙醇是一种公认的、有效的治 局部注射无水乙醇后兔肝细胞中的表达，探讨局部无水乙醇 疗肝癌方式，可使局部肿瘤细胞凝固坏死从而达到治疗 目 注射是否通过肝脏DNA水平引起肝损伤，损伤是否具有时 的。研究兔肝脏局部注射无水乙醇后注射区及周围肝细胞 间性和空间性，以对局部无水乙醇注射的安全性进行实验分 的损伤及再生对指导局部注射无水乙醇的应用有重要意义。 析。方法 家兔20只，随机分为3组 ：注射无水乙醇 1ml组 本研究通过观察核酸损伤标记物 8-OHdG在兔肝脏局部注 (A组 ，8只)；注射无水乙醇 2ml组 (B组 ，8只)；不做任何 射无水乙醇前后不同时点和不同位点中肝细胞的表达，探讨 处理的空白对照组 (C组 ，4只)。B超引导下在兔肝脏 内单 局部无水乙醇注射是否在肝脏 DNA水平引起肝损伤 ，损伤 点单次注射规定剂量无水乙醇，在局部无水乙醇注射后 1、 是否具有时间性和空间性，以对局部注射无水乙醇的安全性 3、7、14天分别处死A、B组动物各2只，C组 1只，观察肝脏 进行实验分析。 大体病理 ，取坏死灶边缘(Ocm)、距坏死灶 1cm处(1cm)及 1 材料与方法 非注射肝叶(Xcm)肝组织 ，固定。采用HE染色和免疫组化 法观察肝组织病理变化及肝细胞中8-OhdG的表达。结果 1．1 实验设备及试剂 PHILIPSHDI5000SONOCT型彩色 A、B组兔局部无水乙醇注射前后8-OHdG阳性率差异具有 多普勒超声诊断仪，探头频率7．5MHz；2％戊巴比妥纳注射 显著性(P0．05)；8一OHdG阳性率随时间推移而降低 ；1em 液、10％中性缓冲福尔马林 (本校外科教研室配制)；无水乙 处8-OHdG阳性率较Xcm处明显减低 (P=0．018)。结论 醇 (广东光华公司，含量 ≥99．7％)；8-OHdG单克隆抗体 局部无水乙醇注射可对兔肝细胞造成损伤；其损伤程度与乙 (N45．1)MOG-020P(日本 JalCA研究所)；即用型免疫组织 醇注入量有关，剂量越大对兔肝脏损伤越大；其损伤具有时 化学 SP试剂盒、DAB显色剂 (福州迈新公司)。 间性和一定空间性。 1．2 实验动物及方法 普通级家兔20只(本校医学实验动 关键词：肝细胞；氧化损伤；8-OHdG；无水乙醇 ；兔 物中心提供，许可证号 ：SCXK桂2003-0003)，月龄3—4个 中图分类号：RQ95—33 文献标识码：A 月，雌雄不拘，平均质量 (2．40±0．52)kg。随机取其 中16 文章编号：1001—7399(2012)02—0207—03 只作实验观察组，按2×4析因设计，随机分为2组，每组 8 只。A组为注射无水乙醇 1ml组，B组为注射无水乙醇2ml 收稿 日期：2011一O8—31 组。余4只家兔，同条件下饲养作为空 白对照组(C组)。 基金项 目：广西 自然科学基金(0640163) 适应性喂养3天后，动物术前禁食 12h，经耳缘静脉注 作者单位：广西医科大学第四附属医院暨柳州市工人医院超声科，