酵母SAMDC基因表达载体构建以及农杆菌介导转化番茄的研究.pdfVIP

( ) 32 (6) : 62 1～627 , 2006 浙江大学学报 农业与生命科学版 　 Journal of Zhej iang University (A gric Life Sci) 文章编号 (2006) 06062 107 酵母 SAMDC 基因表达载体构建以及农杆菌介导转化番茄的研究 丁淑丽 ,李建勇 ,邹宜静 ,卢 钢 ,曹家树 (浙江大学 园艺系 农业部园艺作物生长发育与生物技术重点实验室 ,浙江 杭州 3 10029) ( ) 摘 　要 : SA MDC 腺苷甲硫氨酸脱羧酶 是参与植物多胺合成的一个关键酶. 通过 GenBank 上已经发表 的序列 ,设计两对引物 ,分别以酵母基因组 DN A 和番茄基因组 DN A 为模板克隆出 S A M D C 基因和 E8 启动子. 构建了以 CaMV35 S 和 E8 为启动子的两个 S A M D C 基因植物表达载体 ,酶切分子鉴定后 ,经农 杆菌介导以叶盘法转入番茄中 ,获得了转基因植株. 经 PCR 检测和 XGluc 组织化学染色检测 , 目的基 因已经成功转入番茄中. 为研究多胺在番茄中代谢活性以及 S A M D C 基因对番茄抗逆性和番茄果色的 影响提供了研究基础. 关 　键 　词 : S A M D C 基因; E8 启动子 ; 番茄 ; 载体构建 ; 农杆菌介导 中图分类号 : S64 1. 2 ; Q78 　　　文献标识码 : A D IN G Shuli , L I J ianyong , ZOU Yij ing , L U Gang , CAO J iashu ( Key L aboratory on Grow t h an d D evelop ment of H orticul t u re an d B iotechnology , M i nis t ry of A g ricul t u re , D ep a rtment of H orticul t u re , Z hej i ang Uni ve rs i ty , H angz hou 310029 , Chi na) Construction of gene expression vector of yeast SAMD C and tomato transf ormation mediated by A gr obact er ium t ume f aciens . Journal of Zhej iang U niver sit y (A gric Life Sci) , 2006 ,32 (6) :62 1627 Abstract : Sadeno sylmet hionine decarboxylase ( SA MDC) i s a key enzyme involved in t he bio synt hesi s of t he polyamines , viz . sp ermidine and sp ermine . Two p air s of p rimer s were designed ba sed on t he p ubli shed sequences in t he GenBank . The S A M D C gene and E8 p romot er were amplified u sing yea st and tomato genome DN A a s t emp lat es , resp ectively . Then two S A M D C gene exp ression vector s cont aining CaMV35 S and E8 p romot er s sep arat ely were con st ruct ed . The S A M D C gene