结核分枝杆菌膜蛋白的异源表达和纯化研究进展.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # ’($ ) ’(* 年 月 日 $%% % ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! +,-./01 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 结核分枝杆菌膜蛋白的异源表达与纯化研究进展 ， $ $ 廖 丹 ，谢建平 ，王洪海 （西南大学生命科学学院现代生物医药研究所 重庆 !%%# ） $ （复旦大学生命科学学院遗传学研究所 遗传工程国家重点实验室 上海 $%%!(( ） 摘 要：膜蛋白是一类与生物膜相互作用、具有重要功能和独特结构的蛋白质。异源表达纯化一直是了解膜蛋白 结构和功能的重要瓶颈。结核分枝杆菌作为典型的胞内致病菌，其膜蛋白的研究具有很好的代表性以及重要意 义。目前用于表达膜蛋白的有大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞等表达系统，但结核菌膜蛋白的表达宿主还往往局限 于大肠杆菌。异源表达需要综合考虑蛋白的来源、疏水性、跨膜区等特性。低温、加入共表达因子以及改变培养条 件有助于结核菌膜蛋白的可溶性表达。另外，包涵体复性也是获得结核菌目的膜蛋白的重要途径。随着新的表达 系统，新的促可溶表达策略，新的包涵体复性手段，新的纯化方法的应用，将有更多的膜蛋白异源表达纯化成功，为 蛋白质功能研究奠定基础。 关键词：结核分枝杆菌；膜蛋白；异源表达；纯化 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） G# G’(* H %%%7*$%’ $%% %#7%’($7%# 对于一个有功能的细胞而言，膜蛋白的重要性是毋庸置 具有一定的代表性，它不仅有原核生物中功能保守的膜蛋 疑的。据统计，膜蛋白的编码基因占整个基因组的$% I ) 白，还有类似真核生物的膜蛋白，如：真核样的腺苷酸环化 ［］ ［］ ［］ 酶# * (% I ，它们执行了包括跨膜运输、结构支撑、维持细胞电 、真核样 蛋白 等。所有已知的脂质、聚酮代谢途径 O 势、信号传递和代谢等重要的细胞功能。目前约有 的 在分枝杆菌中都有发现， 的脂质、聚酮合成酶中，很多超 % I N53 ［］ $ 出已知范围，研究它们还有可能获得新的脂质聚酮合成途 药物以膜蛋白为作用靶点 ，同时，很多诊断靶标以及疫苗 分子都