黏蛋白1靶向小干扰RNA对胆管癌细胞侵袭力影响.pdfVIP

·1654· ·实验研究· 黏蛋白1靶向小干扰RNA对胆管癌细胞 侵袭力的影响 李振振李灼日 廖春红李淑芳吴金术 【摘要】 目的构建针对黏蛋白1(MUCI)的特异性小干扰RNA(siRNA)片段，体外观察其对 人胆管癌细胞QBC939侵袭力的影响。方法构建MUCl．siRNA，脂质体法体外转染QBC939，逆转 录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中MUCl mRNA的表达。Boyden小室法测定细胞的侵袭力。结 果双酶切、PCR及DNA测序证实MUCI．siRNA真核表达载体构建成功，转染MUCl．siRNA的细胞 中MUClmRNA表达水平为(0．529±0．011)、明显低于对照组(0．524±0．008)和(O．329±0．010) (P0．01)，且细胞侵袭力(52．56±4．69)也显著低于对照组(160．17±9．79)和(155．67±8．86) (P0．01)。结论成功构建了特异性MUCl．siRNA表达载体；该载体可有效抑制QBC-939中 MUCl mRNA表达，同时显著降低细胞的侵袭力。 【关键词】 胆管癌；RNA干扰；黏蛋白类 Effectsofsmall RNA MUClOilinvasive ofhuman interfering gene potential cholangiocar- targeting in LI cinomacelllinevitro Zhen—zhen。12Zhll,o．ri，幽0Chun．1jlD昭，LIShu-fang，WUJin-shu．Hu- n旧tnProvincialHepotobiliary 4j0005．China Hospital．Changsha Toconstucta vector 【Abstract】Objective MUCl一small interferingRNA(siRNA)expression and itsroleininvasive of cells．MethodsMUCI—siRNAw嬲 study abilitycholangiocareinoma Special eonstuctedandtransfectedinto ceUswithLipofectamine…2000．IntuRNA eholangiocarcinoma vitro．MUCI wasdetected reverse chainreaction(RT．PCR)．andthen， expression byusing transcription—polymerase cellinvasivewasmeasured chamber Double and enzyme ability byBoyden assay．Results digestion．PCR DNA confirmedthattheMUCl siRNA vectorwasconstructed sequencing specific expression successfully． Aftertransfection．theofMUClInRNAwas(0．529±0．01 lowerthanthatin expression 1)。signifieanfly control the invasivenessof groups[(160．17±9．79)，(155．6