DNA分子标记与其在中药中的应用_李隆云.pdfVIP

2002 年第 9 卷第 5 期 中国中医药科技 　　　　　　　　 ·3 15 · ·综述 · DNA 分 子 标 记 及 其 在 中 药 中 的 应 用 1 李隆云 　钟国跃 　卫莹芳 　秦松云 ( 1 ) 重庆市中药研究院 ·重庆 400065 　 成都中医药大学 ·成都 610075 　　中药治疗疾病在中国已有几千年历史 ,特别是治疗慢性 、消耗性 色体重排 ,如大片段的插入和缺失 ,不改变酶切位点 ,但能改变电泳 ( ) 疾病具有独特的、西药不可替代的作用 。中药品种繁多 , 同一种中 带 染色体重排多态性 ;或由于以上变化引起 DNA 线性某一特性内 ( ) 药 , 由于物种及产地 生态型、居群 、化学宗 的不同,其质量差异较 切酶的识别位点发生变化 。这样基因组 DNA 经限制性内切酶切割 ( ) 成不同长度的限制性片段 , 导致其在凝胶上运动速率不同, 用 DNA 大 ,而质量 品质 与中医临床疗效密切相关 。因此 ,为了保证临床用 药的安全及质量和疗效的稳定 ,准确 、迅速 、简捷的中药鉴定方法的 探针进行 southern 杂交 ,放射 自显影后就可得 DNA 限制性片段的多 ( ) [2 ,7 ] 建立已成为当务之急 。 态性 RFLP 。 ( RFLP 标记是一项综合技术 ,涉及 DNA 片段的克隆、基因组 DNA 中药鉴别所依据的遗传标记主要有形态标记 、生化标记 包括免 ) 的提取 、限制酶消化 、电泳 、sorthern 印迹转移 、DNA 探针制备及分子杂 疫学标记 、组织细胞标记 。这些标记都是基因表达的产物 , 易受生 理状态 、生长环境 、贮藏加工 、生长期 、品种等的影响 ,且标记数 目有 交等一系列技术 。 限 ,急需新的遗传标记技术 。自从 Bostein 和 White 等于 1980 年利用 2112 　RFLP 标记的特点　具极大的丰富性 。RFLP 起源于基因组 RFLP 作为遗传标记[ 1] ,开创了直接应用 DNA 多态性发展遗传标记的 DNA 变异 ,探针可随机选取 ,每个标记变异大 ,检测方便 ,检测的可以 新阶段 。近年来 ,随着分子生物学技术的进步 ,DNA 分子标记的新技 是核糖体 RNA 、叶绿体 DNA ,也可以是总 DNA ,可以产生和获得能反 术不断涌现 ,DNA 分子标记技术在中药的应用报道逐渐增多。由于 映种属遗传差异的大量多态性 ,适用于研究属种 ,甚至品种的亲缘关 DNA 分子标记技术具有快速 、微量 、特异性强、准确可靠等特点 ,且不 系、系统发育与演化 ,也可以鉴别品种纯度 、代换系、添加系及用于基 受生育阶