酿酒酵母和糖化酵母原生质体的形成和再生-武汉理工大学学报.pdfVIP

第 28 卷 　第 7 期 武 　汉 　理 　工 　大 　学 　学 　报 Vol . 28 　No . 7 2006 年 7 月 JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY OF TECHNOLOGY 　J ul . 2006 酿酒酵母与糖化酵母原生质体的形成与再生 张华山 ,余响华 ,李亚芳 (湖北工业大学生物工程学院 ,武汉 430068) 摘 　要 : 　对影响酿酒酵母及糖化酵母形成与再生的因素 ———菌龄 、酶浓度 、温度 、酶解时间、预处理剂的浓度和作用时 间及渗透压稳定剂的选择做了初步的研究 ,确定了原生质体形成与再生的最佳条件 :菌龄为 13～15 h ,0 . 1 %β 巯基乙醇 作用 10 min ;在 30 ℃下 ,2 . 0 %的蜗牛酶酿酒酵母 、糖化酵母酶解 1. 0 h ;配制酶解液时渗透压稳定剂采用 0 . 8 mol/ L KCl ,而在稀释及配制再生培养基时则采用 0 . 53 mol/ L 蔗糖 。 关键词 : 　酿酒酵母 ; 　糖化酵母 ; 　原生质体形成率与再生率 ( ) 中图分类号 : 　Q 939 . 53 文献标志码 : 　A 文章编号 : 167 1443 1 2006 Research on Protoplast Formation and Regeneration of S . Cerevisi ae and S . Di ast icus ZHA N G H uas han , Y U X iangh ua , L I Yaf ang ( School of Biotechnology , Hubei University of Technology ,Wuhan 430068 ,China) Abstract :　A series of single factor test and ort hogonal test was used to determine t he optimal conditions for protoplast forma tion and regeneration of S . cereusiae and S . dias taticus . The optimal conditions are t hat keeping yeast age on 13～15 hours ,dis β posing it in 10 minutes by 0 . 1 % Mercaptoet hanol ,t hen using 2 . 0 % snaillase to disintegrate t he cell wall of S . cereusiae and S . dias taticus for 1 hour in 30 ℃warm water ,using 0 . 8 mol/ L KCl to confect snaillase solvent while using 0 . 53 mol/ L su crose to confect dilution and regenerational medium . Key