TRAIL蛋白的表达,纯化与抗肿瘤活性.pdfVIP

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第 23 卷第 9 期 第  三  军  医  大  学  学  报 Vol. 23 , No. 9           1058 2001 年 9 月 ACTA  ACADEMIAE  MEDICINAE  MILITARIS  TERTIAE Sep. 2001 ( ) 论著 文章编号 2001 TRAIL 蛋白的表达、纯化和抗肿瘤活性 ( ) 李小安 ,房殿春 ,杨仕明 ,罗元辉   第三军医大学附属西南医院全军消化专科中心 ,重庆 ,400038   提  要 : 目的  利用大肠杆菌表达出 TRAIL 蛋白 ,并观察分离纯化后的 TRAIL 蛋白的抗肿瘤活性。方法  采用 CaCl2 法将带有 ( ) ( ) TRAIL 氨基酸 114 - 281 ,含六聚组氨酸尾 基因的 pETd 质粒转入大肠杆菌 BL21 DE3 pLysS ,IPTG 诱导蛋白表达 ;使用 NiNTA 层析 柱分离纯化蛋白 ,SDSPAGE 和 Western blot 法鉴定 TRAIL 蛋白的表达 ;MTT 法检测 TRAIL 蛋白的抗肿瘤活性。结果  我们分离纯化 3 出分子量为20. 1 ×10 的蛋白 ,Western blot 法证实为 TRAIL 蛋白 ,MTT 法检测出其有较高的抗肿瘤活性 ,呈现出较好的时效和量效 关系。结论  成功地利用大肠杆菌表达、NiNTA 层析柱分离纯化出具有抗肿瘤活性的 TRAIL 蛋白 ,并证明其具有抗肿瘤活性。 ( )   关键词 : TRAIL 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 ;大肠杆菌 ;抗肿瘤活性   中图法分类号: R378. 21 ;R394. 3 ;R73362 文献标识码 : A Expression and purification of TRAIL protein and its antitumor activity LI Xiaoan , FANG Dianchun , YANG Shiming ,LUO Yuanhui (Department of Gastroenterology , Southwest Hospital , Third Military Medical University , Chongqing 400038 ,China)   Abstract : Objective  To express TRAIL protein using Escherichia coli and observe antitumor activity of purified TRAIL protein. Methods   The pETd expression

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