珍珠菜提取物抗白血病作用及其机制研究_中文摘要_3_4.pdfVIP

珍珠菜提取物抗白血病作用及其机制研究 中文摘要 目的：研究珍珠菜 （Lysimachia Clethroides Duby ）提取物（ZE4 ）的抗白血病作 用，初步探讨其可能的作用机制。 方法：采用药效活性跟踪法进行提取物抗肿瘤活性筛选，建立小鼠白血病 L1210 的体内模型，观察 ZE4 的体内抗白血病作用。用不同浓度的 ZE4 处理人慢性粒细胞 3 白血病细胞株K562 细胞，采用 MTT 法和 H-TdR 测定 ZE4 对 K562 细胞的增殖抑制 作用；用流式细胞仪检测药物对 K562 细胞周期的影响；用单细胞凝胶电泳分析 ZE4 对 K562 细胞 DNA 的损伤；Hoechst33258 荧光染色观察 DNA 片断化的凋亡征象；通 过流式细胞仪和 Western blot 观察 ZE4 诱导的 K562 细胞死亡中的分子机制 3 结果：珍珠菜提取物 ZE4 有明显的体内抗白血病作用；MTT 法和 H-TdR 结果 表明，ZE4 对 K562 细胞的增长有显著的抑制作用，并呈浓度和时间依赖性。流式细 胞仪检测到给药后 K562 细胞发生 G2/M 期或 G0/G1 期的阻滞和凋亡的发生。单细胞 凝胶电泳显示给药后的 K562 细胞出现明显的彗尾状 DNA 溢漏。Hoechst33258 染色 结果显示给药后的 K562 细胞核体积变小、皱缩，可见致密荧光，染色体 DNA 呈浓 染的团块状、颗粒状分布。流式细胞仪检测到给药后 K562 细胞凋亡受体 fas 表达增 高，Western blot 结果显示药物诱导 K562 细胞 Trail、DR5 蛋白表达上调，Bcl-2 蛋白 表达下调。 结论：珍珠菜提取物 ZE4 有明显的体内外抗白血病作用，其作用机制可能是通 过调节一系列的凋亡相关因子诱导细胞发生凋亡和对细胞 DNA 直接杀伤的共同结 果。 关键词：珍珠菜；K562 细胞系；Bcl-2 ；Fas ；DR5 作 者： 张威 导 师： 唐丽华 副教授 梁中琴 教 授 I Studies on the anti-leukemia effect of the extract from Lysimachia clethroides Duby and its mechanism Abstract AIM: To study the anti-leukemia effect of the extract from Lysimachia clethroides Duby and its primary mechanism. METHODS: Using the active tracking method to find the effective composition of LCD. Then we investigated the inhibitory effects of ZE4 on the transplantable tumor models of S1210. After treatment with ZE4, the growth inhibition of K562 cells was assessed by MTT colorimetric assay and 3H-TdR assay.The effect on cell cycle in K562 cells was observed by flow cy