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使用环糊精固定相的高效液相色谱 朱道乾 （中国科学院大连化学物理研究所，116011） 环糊精（Cyclodextrin，简称CD）是由 固 定 相 吡啶喃葡糖与a-14-葡糖苷反应生成的环 状低聚糖1〕。环糊精的口袋结构和疏水性内 用不含氮的连接剂，将 CD键合在直 腔能包结不同的化合物。这种包结作用被广 径5μ蘭m球状硅胶上。合成的固定相是：Ⅰ瘢未 泛利用在分析化学中〔1—4。本文介绍三种β- 修饰（ -GPS， ．乙酰化修饰（AC- 环糊精键合固定相，并用于液相色谱分离结 CD-GPS， ．甲基化修饰（DM-CD- 构异构体和光学异构体（对映体）化合物。 GPS。其结构如下： 被环糊精包结的化合物分子，如分子大 酚在改变甲醇-水比例后也能分离）； 柱 小（或分子的一部分）与腔体空腔相匹配， 除二硝基苯（mP 硝基酚O，M）外都能分 并且空间位置正好使各种作用力充分发挥， 离； 柱仅能分离甲酚、碘苯胺和氨基苯甲 这样形成的包结物就稳定；反之稳定性差。 酸。 柱优于 、 柱， 柱最差；差异是 利用其稳定程度不同而达到分离。这种包结 由于修饰改变了疏水性腔内径和空间位置。 作用是不同于吸附与分配的又一种新的分离 通常是内径增加分离降低。另外，不同的修 作用。环糊精固定相已成功用于二取代苯结 饰基自身也对分离产生各种影响，如空间阻 构异构体的分离5。目前，利用包结作用分 碍、氢键作用、不同的分配作用等。在分离 离对映体是该领域的前沿课题。 的顺序上（o，m琾p）也有明显差异。多数为 om 顺序；但含有硝基的出现o＞m， 结果与讨论 二硝基苯更为明显； 柱分离二硝基苯和氨 （一）二取代苯的分离 基苯甲酸时顺序完全相反（om P。 分离条件：柱长10cm，内径4mm，甲 （二）对映体的分离 醇-水为移动相，常温分析。用保留时间数 环糊精是手性化合物，被拆分的对映体 据绘出图1。从图1可看出8种二取代苯在 分子必须能进入腔内，并具有空间对映作用 柱上全部都能分离（其中硝基苯胺和硝基 — “三点接触”〔8，才能满足分离的基本 条件。分析条件的影响主要是移动相的选择。 实验中。用分离柱 ，分析条件同表1。以 用甲醇-磷酸系、甲醇-水系、甲醇-三乙胺· 下五种对映体中，能分离的只是a-氨基乙苯 醋酸系缓冲液等移动相时，分离度各不相同 和扁桃酸甲脂（分离度分别为1.10和0.68。 或无分离，实验结果以甲醇-三乙胺醋酸系 这种高特征性的分离机理目前仍处于探索阶 缓冲液较好。表1列出不同pH和甲醇含量 段，但是人们一旦搞清楚其分离机理后，色 的移动相对分离的影响。由表可看出随甲醇 谱分离将会进入一个新时期。 含量增加分离度下降；无甲醇时保留时间很 长；pH增加时分离度几乎无变化，但保留 时间有增加；移动相的最佳条件是pH＝4， 10％甲醇含量，即样品保留时间在10min左 右时分离最好。丹酰-DL-氨基酸的分离也 按此规律选择了甲醇含量 （表2 。以15种 丹酰-DL-氨基酸为试样，实验结果能分离 其中9种7〕表2列出的是 柱与Ⅱ柱分离 最好的数据，Ⅲ柱全无分离。图2是N-丹 酰-DL-苏氨酸与丹酰-DL-苯基丙氨酸的色 谱分离图。 环糊精分离对映体的特征还表现在以下 表l 移动相PH与甲醇变化的保留时间（ts分） 和分离度（Rs 114141982。 〔2〕陈国亮、章道道，化学通报，7,11938。 田伏岩夫、新海英