罗丹明6G缔合微粒光度法检测羟自由基及其在离体筛选抗氧化剂中的应用.pdfVIP

第26卷，第11期 光谱学与光谱分析 2O0 and 6年11月 SpectroscopySpectralAnalysis 罗丹明6G缔合微粒光度法检测羟自由基及其在 离体筛选抗氧化剂中的应用 梁爱惠1，蒋治良¨，周苏梅2，周玉婵2，梁月园2，陈丽玉2 1．桂林工学院材料与化学工程系，广西桂林541004 2．广西师范大学资源与环境学系，广西桂林541004 m) 明B(．=【一一554nrn)、罗丹明6G(A一一526m)、罗丹明S(A一一526m)和丁基罗丹明B(A一一556 形成缔合微粒，导致其吸收峰降低。羟自由基浓度(以Hz ～o．680肛g·mL 丹明S和丁基罗丹明B体系的吸光度降低值成正比。据此建立了一种测定抗氧化剂对羟自由基的清除率的 新方法。测试了抗坏血酸等4种抗氧化剂以及6种茶叶提取液的抗氧化活性，所得到的结果较为满意。 主题词罗丹明染料；羟自由基；Fenton反应；分光光度法；抗氧化剂；清除率 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2006)11—2113一03 罗丹明染料缔合微粒光度法及筛选测定抗氧化剂的新方法。 引 言 该法具有简便、快速、灵敏和适用范围广等特点。 羟自由基是一种氧化性很强的自由基，能发生电子转 1实验部分 移、夺取氢原子和羟基化等反应，使糖类、氨基酸、蛋白质、 核酸及脂类等发生氧化而损伤和破坏；它还与衰老、肿瘤、 1．1仪器与试剂 辐射损伤和细胞吞噬有关[1]。对机体适当补充外源性抗氧 化剂或服用能使机体内源性抗氧化物质恢复到一定水平的 仪器有限责任公司出产)；722S分光光度计(上海精密科学 药物，可以改善这些状况。由于长期使用化学合成的抗氧化 仪器有限公司)。 剂对人体有一定的副作用，所以，寻找天然、安全和无毒的 1．o×10_3 H101．L-1 m01· 抗氧化剂就越来越受到人们的重视[2]。同时，利用抗氧化类 NaAc缓冲溶液；1．o×101KI；1．o×10_4 药剂对羟自由基发生的抑制效应，是离体筛选抗氧化药物 L～1H202；5．O×10—5 的一个重要手段。因此，研究快速、灵敏和实用的羟自由基 mol·L_1罗丹明S(RhS)；1．O×10-4 的检测方法具有重要意义。目前，测定羟自由基的方法主要 (Rh6G)；5．OxlO-5 有光度法、荧光法、电子自旋法、气相色谱法、高效液相色 10叫m01．L1抗坏血酸；5．O×101m01．L_1甘露醇； 谱法、电化学法以及化学发光法等[z-“。光度法具有简便快 速等特点，但灵敏度欠佳。其余仪器分析法灵敏度虽高，但 茶叶提取液的制备：在烧杯中加入蒸馏水煮沸后，称取 这些方法或仪器特殊，或试剂昂贵，使其应用受到限制。罗 适量的茶叶放入，用慢火煮30min，所得提取液待冷却后过 丹明染料是一种常用的稳定的分析试剂，近来研究发现它 滤、移人100mL容量瓶中，即得储备液；用时稀释即可。 的缔合微粒存在变色效应、荧光猝灭效应和共振散射效 应[7]，并得到较好的应用。本研究用无毒易得的碘化钾来捕 弘g·mL_1金银花茶；15．opg·mL-1茉莉花茶；3．opg· 获Fenton反应的羟自由基，生成的F和罗丹明染料反应形mL_1苦丁茶；5．o 成缔合微粒，使体系的吸光度降低。据此建立了羟自由基的