肝癌组织中c-MET基因突变的研究.pdfVIP

维普资讯 ·- - — — 798 __—‘— Q nJlabDiagn，July，2OO6，V0ll0，No．7 文章编号：1007—4287(2006)07一cr798—02 肝癌组织中c—MET基因突变的研究 王继生，周 斌，徐鲁白，郑志强 (温州医学院附属二院 外科，浙江 温州325027) 摘要：目的 研究肝癌原癌基因e-加四突变和缺失。方法 采用 PCR-SSCP和DNA测序方法，对 37例肝癌患者 肿瘤组织标本的c-MET基因15—19外显子进行检测，研究 c-加盯基因的缺失和突变情况。结果 发现5例有 c．-MET 基因外显子 15一l9存在点突变，突变率为7．4％。结论 c-Ⅶ 基因的突变与肝癌的发生和发展有一定的联系。 关键词-肝肿瘤；c．ME3基因；突变 中图分类号 ：耵35．7 文献标识码 ：A M,_a_a_LJonof M rgeneha]fl~algtlliCaI帜 WANGJi-sheng，ZHOUBin，XULu-bai，et ．(WenzhouMedicalCollege2ndHos- pital，Wendum325027，China) Abs嘣 ：Ob~ ive AIMToinvestigatethemutationofc-METgeneinhepaticoan(~r．Methods 37specimensofllepalic 岫ce玛 screenedformutationbyPCR-SSCPandDNAse 地r-oe．Results 7casesofhepaticcallo~rwerescreenedtOhavemu- tmion，DirectDNAgw~quellceanalysisshowedsynonymousmutationsintwopali∞tsandattwo-basesequencec}lar (AC卜ATnn exon17．ATG-ATAina∞n19)．Colldl~oll c-METgenemaytakepartinthedevelopmentafhcp~i~Oall(~r． KeywOrds：hepaticc眦唧 ；mutation；ssep (Chin．『Lab脚 ，2006，10：798) c．MET原癌基因编码蛋白为一种跨膜生长因子 提供)。经紫外分光光度计检测 DNA纯度和浓度， 受体。该蛋白为一杂二聚体，由二硫化物连接的 4~C保存、备用。 50kDa大小a链和 l45kDa大小的p链组成，p链的 1．2．2 PCR 本实验采用5对引物扩增 c．MET基因 胞浆侧具有酪氨酸激酶活性…。由于其被证实为肝 的l5一l9外显子，引物均由大连宝生物合成。引物 细胞生长因子的特异性受体，因此许多研究者对于 的序列及扩增片段大小等见表 l。 c．MET在肝肿瘤发生机制中所起的作用进行了探 索。肝癌中c．MET基因改变的研究不多，有限的报 Table-1 c．^d旧Tgenesequence 道表明：c．MET基因在肝癌中的异常表现发生在外 显子[22】。我们在本研究采用 PCR和 DNA测序方法 对37例肝癌病人的新鲜肿瘤组织标本进行 c．MET 基因的突变研究，探讨 c．MET基因异常在肝癌发生 过程中的作用。 l 材料与方法 1．1 材料 37例肝癌组织标本来 自温州医学院附属二院 外科手术中采集的新鲜标本，患者未经化疗和放疗， 标本经病理检查证实为肝癌。其中男性20例，女性 l7例，最小年龄 28岁，最大7O岁，中位年龄 55．4 PCR反应总体积20 ，其中