Taqman+MGB探针快速定量检测VHSV方法第研究.pdfVIP

高技术通讯 年第 卷第 期： ： 探针快速定量检测 方法的研究! # 许建明 张念之 蒋一男 张利峰 夏 春 （中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室 北京 ） （北京出入境检验检疫局 北京 ） 摘 要 为建立准确实时地定量检测病毒性出血性败血症病毒（ ），在 基 因保守区设计了 探针与引物对，随后，采用体外转录技术获得了 基 因 ，并以此为绝对定量标准品，建立了绝对定量（ ）检测 的实时荧光 法（ 方法），并与世界动物卫生组织（ ）推荐的普通 法进行了 比较。此荧光 法特异性好，与其他鱼类弹状病毒无交叉反应。检测线性范围为 拷贝 反应，灵法度达 拷贝 反应。此检测灵敏度比 推举的 法高 出 个数量级，比嵌套 高出 个数量级。此法是出入境检疫 的有效方法。 关键词 病毒性出血性败血症病毒（ ）， 探针，荧光 法，定量检测 试验 （ ， ）、 ［ ］ 引言 法在 检测上均取得了可靠的结果 。 其中， 等（ 年）报道了 探针实 病毒性出血性败血症（ 时荧光 法 （ ）检 测 ， ）是一种危害水产养殖业的重要疾病，属 ［ ］。 认为在 基因设计探针其效率 于世界动物卫生组织（ ）规定须申报的一种疫 高于 基因；并证明了实时荧光 法比普通 ［ ］ 病 。 主要流行分布于北半球，可感染数十种 法以及细胞培养分离病毒法更可靠，其灵 ［ ， ］ ［ ］ 鱼类，死亡率可达 。 病原为病 敏度为 个感染单位 。然而，随着 分离 毒性出血性败血症病毒（ 株的增加，我们发现