米曲霉β-呋喃果糖苷酶基因克隆及生物信息学分析.pdfVIP

米曲霉β-呋喃果糖苷酶基因克隆及生物信息学分析.pdf

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维普资讯 208 200Vo1.29,No.06 食 品 科 字 ※生物工程 米曲霉B一呋喃果糖苷酶基因克隆 及生物信息学分析 唐江涛 ,覃益 民1,杨 梅 1,姚评佳2,魏远安3一,唐尹萍 (1.广西大学化学化工学院,广西 南宁 530004;2.广西大学生命科学与技术学院,广西 南宁 530004;3.广西大学亚 热带生物资源保护利用重点实验事,广西南宁 530004,4.湖北中医学院药学院,湖北武汉 430065) 摘 要:p.呋喃果糖苷酶水解蔗糖和低聚果糖,酶法生产高纯度低聚果糖,必须抑制或消除 p.呋喃果糖苷酶的 水解活性。本研究以工业生产低聚果糖的米曲霉菌株GXO015为研究材料,采用RT.PCR技术,克隆获得 .呋喃 果糖苷酶基因(GenBank登录号:EU130944)。利用生物信息学手段对 p.呋喃果糖苷酶基因进行分析得知:该酶为 456个氨基酸组成的亲水性膜外蛋白;功能域分析结果显示:该酶从第52个至第456个氨基酸残基之间序列属于糖 苷酶32家族特征序列,并具有糖苷酶32家族酶活性中心的(N/G)DP(CN/)G和RDP保守序列;米曲霉p.呋喃果糖 苷酶在进化树上的位置处于酵母菌的转化酶和细菌的六磷酸蔗糖水解酶之间。 关键词:p.呋喃果糖苷酶 ;克隆;生物信息学分析 CloningandBioinformaticAnalysisof13一fructofuranosidaseGenefromAspergillusoryzae TANGJiang-tao,‘QINYi-min,YANGMei,‘YAOPing-jia,WEIYuan-an·,TANGYin-ping (1.CollegeofChemistryandChemicalEngineering,GunagxiUniversity,Nnaning 530004,China; 2.CollegeofLifeSciencenadTechnology,Guna gxiUniversity,Nnaning 530004,China; 3.Guna gxiKeyLaboratoryofSubrtopicalBioresourcesConservationnadUtilization,GunagxiUniversity,Nnaning 530004 China;4.DepartmentofPharmaceutical,HubeiCollegeofTraditionalChineseMedicine,Wuhna 430065,China) Abstract:p-fructofuranosidase(FRU)hydrolyzessucrosenadfructooligosaccharide(FOS).Therefore,theFRUenzymatic activiyt shouldbeinhibitedoreliminatedfortheproductionofFOSenzymatically.Inthisstudy,ap-fructofurnaosidasegene wasclonedwihtRT-PCRfrom AspergillusoryzaeGX0015whichisakeystrainofrFOSproductionindustrially.ThisgeneWas sequencednadsubmittedtoGenBank(accessionnumber:EUl30944).ThesequenceWasnaalyzedbioinofrmatically.The resultsshowedhtatFRU composingof456aminoacidsisahydrophilicproteinwihtouttransmembranehelices.Theglyc

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