huGM-CSF(9-127)-IL-6(29-184)融合蛋白的复性和纯化研究.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( * # 年 月 $%%$ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-. $%%$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! （ ） （ ）融合蛋白的复性及纯化研究 !#$%’( )%*+, %-.%/ +)%*01 孙强明 刘红岩 戴长柏 马雁冰 孙茂盛 徐维明 （中国协和医科大学中国医学科学院医学生物学研究所分子生物室，昆明 0%!!） 摘 要 利用 离子交换柱层析在 尿素变性条件下对 （ ） （ ）融合蛋 2 C4?D-E(F4 G * H * 8()I J D;K,/1CL M/!$5 /NJ/0 $M/!6 白进行初步纯化，然后再利用C4?D-AE.) C/$%% 分子筛柱层析复性及纯化后获得目的蛋白，其纯度达到M O 以上。该 纯化方案成功地解决了稀释复性或透析复性产物在进行2 C4?D-E(F4 G * H * 离子交换柱层析时目的蛋白不稳定而沉 积于柱上的问题，获得了较好的复性效果，复性率达到 以上。使用该纯化方案，天内便可基本完成重组蛋白 % O ! 的复性及纯化过程，而且也便于扩大。 关键词 D;K,/1CLI NJ/0 融合蛋白，复性，纯化 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） 2!0 P !%%%/#%0! $%%$ %#/%$M!/%6 粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子（ ）是 通过 凝胶过滤分子筛柱层析复性和 / ED;K,/1CL C4?D-AE.) C/$%% 一种已广泛应用于临床的造血细胞因子，它对各种 进一步纯化成功地解决了该问题。 原因引起的骨髓抑制和白细胞减少症均有一定疗 ［］ * 材料与方法 效! 。白细胞介素 （ ）也具有多重的生物活 /0 D;NJ/0 性， 在骨髓干细胞的增殖分化中起重要作用， * 2 * 试剂 D;NJ/0 分析纯尿素购自重庆东方试剂厂， 购自上 且与 、 等合用时表现出协同刺激效 3E9F D;NJ/# D;K,/1CL ［］ 海生工生物工程有限公司， 和 应$ 。临床研究表明， 能促使化疗病人血小板 2 C4?D-E(F4 G * H * NJ/0 ［］