Klotho水平和小鼠月龄相关并抑制其骨髓源性内皮祖细胞衰老.pdfVIP

重庆 医学 2009年 12月第38卷第 24期 31l1 · 论 著 · Klotho水平与小 鼠月龄相关并抑制其骨髓源性 内皮祖细胞衰老 姜 靖 ，黄 岚 ，赵 晓辉 ，喻 杨 (第三军 医大学新桥 医院心血管 内科，重庆 400037) 摘 要 ：目的 观察不 同月龄小鼠骨髓源性 内皮祖细胞 (endothelialprogenitorcells，EPCs)数量和部分生物学功能以及外周 血抗衰老蛋 白klotho(K1)表达水平，探讨Kl对体外培养的老龄小鼠EPCs数量和功能的影响 。方法 采用western-blot法测定 不 同月龄小 鼠外周血 Kl水平 ；以密度梯度离心法获取老龄小 鼠单个核细胞与不 同浓度的K1孵育，分别采用 acLDI一DiI和 FITC— lectin荧光双阳性细胞计数 、MTF分析和改 良的 Boyden小室法来检测其数量 、增殖、迁移 能力的变化 。结果 不 同月龄小鼠 EPCs数量和功能 以及外周血 Kl水平均与月龄呈负相关；不 同月龄小鼠Kl表达水平与外周血 EPCs数量及其增殖和迁移等生物 学功能具有相关性；体外培养中Kl可呈浓度依赖性上调 EIcs的数量及其迁移能力、增殖能力。结论 月龄增加可导致小鼠内 皮祖细胞数量和功能下降，并下调 肾脏和外周血 Kl水平 ；K1可增加体外培养的小鼠内皮祖细胞的数量 ，改善其功能。 关键词 ：衰老 ；Klotho；内皮祖 细胞 ；小鼠 中图分类号 ：R365．329 文献标识码 ：A 文章编号 ：167l--8348(2009)2431】】一O4 K lothorelateswith monthsofm iceanditsanti—senescenceeffectson bonemarrow derivedendothelialprogenitorcells JIANG Jing，HUANG Lan，Zt{A()xiao—hui，eta1． (DepartmentofCardiology，XinqiaoHospital，ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400037，China) Abstract：Objective Toinvestigatethefunctionchangeofbonemarrow derivedendothelialprogenitorcells(EPCs)andKlotho (KI)levelindifferentagingmice，andtoobserveK1influenceonpartbiologiicalfunctionofagingmiceculturedinvitro．M ethods UsingW estern—blottodetecttheperipheralbloodKIlevelofdifferentagemice，gettingmononuclearcellsfrom agingmicebone marrow ，usingchemicalanalysisafter7daysculture，Et’Csofagingmice(twenty-monthold)wereincubatedwithdifferentconcen— trationsKI，measuredasacIDI DiIand FITC UEA一1doublepositivecel1．Using MTT analysisand improved Boydenchamber methodtodetectEPCsproliferationandmigrationactivity．Results TheperipheralKIlevelwasimpairedinagingmiceaswellas thenumberandpartfunctionalactivitiesofEtCssuchasproliferationandmigration adhesion，K1promotingbonemarrow stem cellsofagingmiceculturedinvitrodifferentiatedintoEP(、，a