HLA抗原DNA分型.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)14(5)：44- 48 1992 综 HLA抗原的DNA 分型 述 蒋伟宏 陈，仁彪 上（海第二医科大学生物学教研室，200025) HLA系统定位于6p2l.3，是人体内最复杂的遗 子生物学发展开辞了一个新起点。许多研完Hl.h系 传多态性系统，在免疫调控过程中发挥 重要作 用。 统的实验室竞相运用PCR技术，结合等位基因特异的 HLAI类基因区域包括HLA-A,B,C,E,F,G基因 寡核昔酸 A（llele-specificOligonucleotide,ASO)或 和 11个假基因“’‘。HLA一A,B和C基因座编码A,B 顺序特异的寡核普胶(Sequence-specificOligonucleo- 和C抗原a链 (44kd)，它通过第三个功能区与受痊于 tide,SSO)探针对 HLA系统进行寡核昔酸分型,2_3 第 15号染色体的月，微球蛋白链 (12kd）作非共价结 也有直接利用PCR扩增产物作RFLP分沂进行DNA 合构成杭原分子，其多态性取决于。链的第一、二功能 分型「6，+，O DNA分型方法适用于任何有核细袍， 区。HLA-E,F和G基因编码I类样产物，其功能未 显示的结果与血清学或细胞学分型结果高度对应，而 明。I类抗原分布于任何有核全』饱表面，主要参与提 且能够发现血清学或细抱学方法不能检测的额外特异 供外来伉原给T细胞毒细胞’「’“。HLAII类基因座在 性，在理论上有助于进一步研究HLA系统基因的结构 HLA-D区，主要包括 HLA-DR,DQ和 DP三个}2 和功能。对一些无法作常规分型的病例如裸露淋巴细 区。DR亚区有6个基因座：DRA,DRB1,DPB2, 胞综合征、严重联合免疫缺乏症等，DNA分型叮解决 DRB3,DRB4和 DRB5，其中DRB2为假基因；DQ 骨髓移植供受体配型问题 哪‘’。 亚区有4个居因座：DQA1,DQB1,DQA2和DQB2, 其中DQA2和 DQB2未知有产物表达；DP亚区也 一、RFLP分 型 有4个基因座：DPA1,DPB1,DPA2和DPB2，其 1.HLA系统1类抗原 中DPA2和 DPB2为假基因。此外，还有DO和DN 群体内共有的酶切片段称同种型基因位 (Isoge- 两个新亚区，各具有DOB和DNA （注意勿与脱氧核塘 notope),群体内有不同的晦叨片段称同种异型基因 核酸的缩写 DNA相混淆），分别产生DO(链和DNa 位 (Allogenotope)}+3oRFLP分型是从杂交片段格局 链 「’‘。11类抗原 HLA-DR,DQ和 DP存在于B淋巴 中发现一些与扰原特异性对应的特异杂交片段。首例 细胞、巨噬细胞和激活的T淋巴细胞表 面， 由。链 报道运用 Southern印迹法研究 HLA系统抗原多态 (32-35kd）和R链(28-30kd）非共价组成。。链无 性的等位基因是 HLA-B8, Cann等人(8，用 EcoRV 多态性或多态性程度不高，R链的第一功能区呈现高 和 HLA-B基因座基因特异的 cDNA探针 （1.4kb), 度多态性。 11类抗原参与提皇外来伉原给T辅助细 对35个无关个体进行基因组 DNA印迹分析，得到 胞，后者在识别外来伉原的同时识别HLA11类坑 一组有 13条杂交带的多态性格局，发现其中8.6kb片 原 ，「，’。据 1987年第十届国际组织相容性试验专题会 段与 HLA-B8对应。进 一步作家系调查，证实8.6k6 议报道，HLA系统检出148种抗原特异性，其中A基 与B8单倍型一起分离。由于 I类基因之间存在着较 因座 24种，B基因座52种，C基因座 11种，D区26 大的同源性以及血清学上 I类伉原多态性程变较 高， 种，DR亚区20种，DQ亚区9种和DP亚区6种。 尤其是B基因座，因此，仅仅用几种限制酶及 1类基因 HLA-A,B,C,DR和DQ抗原系由特异性同种异 特异的探针作分型，在 DNA水平上找出对应杭原