电渗析技术在脱氧核糖核酸在线富集芯片中应用.pdfVIP

第4 1 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE )摇 研究报告 第2 期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2013 年2 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 242 ~246 DOI:10.3724/ SP.J.1096.2013.20565 电渗析技术在脱氧核糖核酸在线富集芯片中的应用 1 * 2 1 2 1 黄华斌摇 庄峙厦 摇 胡 佳 摇 杨朝勇摇 王小如 1 2 (厦门华厦职业学院检验与科学技术系,厦门361024 )摇 摇 (厦门大学化学化工学院,厦门361005 ) 摘摇 要摇 基于电渗析技术,制作了一种“三明治冶式的膜分离微流控芯片,用于脱氧核糖核酸(DNA )的无损伤 在线富集。 以花菁类染料为荧光指示剂,实现DNA 在此芯片中的在线富集观测;分别以姿鄄DNA 和姿鄄DNA鄄 血红蛋白混合体系为模型化合物,探究其在此芯片中的富集特性;对浓缩液进行凝胶电泳实验,以考察DNA 是否变性,并进行聚合酶链反应,以证明本芯片回收的DNA 可供进一步的生物分析。 结果表明:以花菁类染 料为荧光指示剂,本芯片成功实现DNA 的在线富集观测;本芯片能够无损伤捕获并浓缩单一体系和简单混 合体系中的DNA 分子,DNA 的富集倍数近50 倍,回收率约30% ,浓缩液可用于进一步的生物分析。 关键词摇 电渗析;脱氧核糖核酸;富集;微流控芯片 1摇 引摇 言 目前,针对微流控芯片分析系统中的样品预处理方法和技术的研究已成为分析化学的研究热点之 [1,2 ] 一 。 与宏观体系纯化不同的是,在微流控芯片系统中,由于微体系的缩微化,大大减小了样品及试剂 [2 ~ 8] 的用量,缩短了纯化浓缩所需要时间,提高了实验效率。 已经有多种相关的方法和技术的报道 ,如 [9] 基于电驱动 的场放大堆积、等速电泳、等电聚焦技术;以及基于固液双相相互作用的过滤、膜分离、固 相萃取等。 固液双相分离富集是一种既可实现待测物的浓缩富集又能够去除杂质组分干扰的样品预处 [10] 理技术,而且它比较容易与微流控芯片系统结合实现芯片上操作 。 膜分离技术在微流控芯片系统中主 [11] 要用于生物样品中小分子与大分子组分之间的分离富集。 Khandurina 等 在利用电泳对试样中脱氧核糖 核酸(DNA )组分进行分析之前,在试样口与侧通道之间加装了硅酸钠多孔膜。 该膜允许溶剂和小分子 通过,DNA 则被阻挡、聚集,而导致浓度不断提高。 该膜的引入使DNA 的富集倍数提高了两个数量级。 [8] 本研究在原有工作的基础上 ,集成膜分离与电驱动技术至微流控芯片上,构建可用于DNA 分子 纯化浓缩的预处理芯片;此芯片基于阳离子交换膜对DNA 的截留,以恒流泵为液流驱动力,有效设计并利 用流路死体积,在芯片上构建“三明治冶式的DNA 无损伤捕获浓缩装置,并实现