小鼠L833细胞系和亚系标记染色体分析.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)13(1);24-251991 小鼠L83。细胞系及亚系标记染色体分析 杜维霞 赵乃坤 刘秀敏 卫（生部工业卫生实验所，北京 100088) 粒细胞白血病细胞系L83，是由小鼠垃细胞白血病Lso，的骨髓细胞经体外液体培养建立起来 的体 外细胞系，L#33-A和 L833-B是从L83，分离出的亚系。L8331L833-A和 L833-B细胞系及亚系核型分 析采用胰蛋白酶消化、姬姆萨染色分带技术。结果显示L83，细胞系核型与Leo,瘤株核型相同，染色体 数量为亚二倍体，众数为”条，Y染色体丢失和存在一个大的标记染色体 M（r).L833-A和L833-B亚 系各存在另一条标记染色体 Mr：和 Mrb，同时标记染色体Mr仍然存在在 L833-A和 L833-B两个亚 系内。 关键词：L83，细胞系，染色体，核型 近年来，在肿瘤研究过程中，由于广泛应用 1:40姬姆萨磷酸缓冲液染色20分钟，自来水 染色体分带技术，不但能够发现肿瘤细胞染色 冲洗，阴干。 体数 目和结构的异常，而且也能追溯肿瘤细胞 选择分散好的分裂中期染色体进行染色体 的来源。我们应用这一方法曾报道了辐射诱发 计数，对分散好，带型清晰的染色体进行显微照 的Lso：小鼠粒细胞白血病模型的骨髓细胞染色 像，配对进行核型分析。 体核型分析[4［,51oLs3，细胞系是由Lso，白血病小 结 果 鼠骨髓细胞经体外长期液体培养建立起来的小 鼠粒细胞白血病细胞系，有关L333的一般生物 Lso,粒细胞白血病模型，骨髓细胞经体外长 学特性另文已做过详细报道。本文将其染色体 期液体培养 一（年以上）建立起来的L833细胞 核型变化报告如下。 系，细胞的染色体数目仍是亚二倍体，众数为 ”条，并仍具有原白血病模型核型特有的异常。 材 料 和 方 法 即：存在一个大的标记染色体，Y染色体丢失 材料 L833细胞系 L（833-A和 L833-B细 和部分2号染色体呈单体。 L833-A (98T-}和 胞亚系）在 Fishers培养液中加20务马血清培 102代）和 L83,-B(99,102和103代）细胞亚 养，2-3天换液一次，连续传代。在换液后48 系，各自出现了新的标记染色体。 小时加秋水仙素0.06tzg/ml培养基，再继续在 一（）染色体数目的变化 从制片中分 37℃恒温箱中培养4-6小时。然后按常规方 别计数L833细胞系和 L833-A,L833-B细胞亚系 法用0.075mol/LKCl在室温下低渗30分钟， 各200个分裂中期细胞的染色体数目，染色体 用甲醇：冰乙酸 (3:1V/V）反复固定3次，细胞 数 目的分布如图1所示。认定各细胞 亚（）系的 滴于载玻片上，空气干燥。 染色体均为亚二倍体，众数为39条，分别占计 G显带方法 参考 Seabrightn3，的方法 数细胞总数的89.0多、82.0％和85.0多，38条 稍加改进，染色体标本在80℃烤箱中烘烤2小 Du Weixia etal.:M arkerChromosomeAna- 时，冷却后置于0.25％胰蛋白W4洛液中，洛液 lysisofMouseLs33CellLineanditsSublines 温度为250C(Difico,pH7.0)，消化 6-10秒， 本文于1987年3月5日收到，1990年9月 L日修回。 染色体的细胞分别占计数细胞的9.0务、16.4务 二（）染色体结构的变化 镶撼色troorl1卿 和 12.5务