5-氮杂-2’-脱氧胞苷对苯诱导大鼠骨髓细胞周期改变的体外试验及研究.pdfVIP

R135.1+2 5-氮杂-2’-脱氧胞苷对苯诱导大鼠骨髓细胞 周期改变的体外试验研究 左昕 高艾 田 琳牛丕业 宋珊 珊 郭伟 首都医科大学公共卫生与家庭医学学院劳动卫生与环境卫生学系，北京100069 [摘要] 目的 探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷：5-aza)对苯处理大鼠骨髓细胞(BMC)周期的影响及其作用 机制。方法 以指数生长期的正常大鼠BMC作为空白对照组，以10mmol/L苯处理BMC24h为苯处理组，苯处理后用 10μmol/L5-aza处理72h为苯+5-aza处理组；运用流式细胞术检测细胞周期变化，实时定量PCR检测CyclinD1和p27 mRNA表达的变化，Westernblot检测Cyelin D1和 p27蛋白表达的变化。结果 与对照组比较，苯处理组细胞S期比例 显著增高42.5％，G1期比例下降31.5％(P＜0.01)，同时伴随Cy(c)linD1mRNA和蛋白表达显著增加，p27mRNA和蛋白 的表达显著下降(P＜0.01)；与苯处理组相比，苯+5-aza处理组G1期比例上升52.7％，S期比例下降56.2％ (P＜ 001).同时伴随CyclinD1(、)/p27mRNA和蛋白的表达发生显著性的逆转(P＜0.01)。结论 5-aza逆转苯所致的细胞周 期改变，伴有CyclinD1和P27表达改变。 [关键词]5-氮杂-2-脱氧胞苷；苯；细胞周期；实时定量PCR Effectandmechanismof5-aza-2-deoxycytidineoncellcyclecbangeof ratbonemarrowcellsinducedbybenzeneinvitro ZUO XinGAO AiTIAN LinNIUPi-yeSONGShan-shan GUO Wei SchoolofPubliclle(a)(l)thandFamilyMedi(e)ine,CapitalMedicalUniversity,Beijing100069,China [Abstract] Objective ToobservetheeffectandmechanismofDNAmethyltransferaseinhibitor5-zza-2-deoxy(e)ytidine(5-aza)on cellcyclechangeofratbonemarrowcells(BMC)inducedbybenzene MethodsBMCwererandomlydividedintothreegroups:controd group,benzene-treatedgroupwhichwasexposedto10mmol/Lberzenefor24h,benzene +5-azagroupwhichwasexposedto10mmol/L benzenefor24handthentreatedwith10μmol/L5-azafor72hCellcyclewasmonito(t)edbyflowcytometry.CyclinD1andp27mRNA expressionweredeterminedbyreal-limePCR,andCyclinD1andp27proteinexpressionweredetectedbywesternblot.Results TheS phaseratieinbenzene-treatedgroupsignifi(o)cantlyinereased42.5％ comparedtothecontrol,G1phaseratiodeereased31.5％ (P＜0.01), andaccompaniedwiththesignificantincreaseintheexpressionsofCyclinD1mRNAandproteinandthesignificantdecreaseinthe expressionsofp27mRNAandprotein(P＜0.01).TheG1phaseratioinbenzene+5-azagroupincreased52.7％ (P＜0.01)comparedto benzene-treatedgroup.Sphaserat