枳实通便汤对慢传输型便秘大鼠结肠GDNF+NOS+表达影响.pdfVIP

枳实通便汤对慢传输型便秘大鼠结肠GDNF与NOS 表达的影响 范一宏，吕宾，徐国萍，冯雯 浙江中医药大学附属第一医院 杭州 310006 中国 摘要：背景：慢传输型便秘(slow transit constipation ,STC) 是一类胃肠道传输功能障碍的顽 固性便秘，以结肠传输减慢为特点。其可归属于中医 “便秘”、 “脾约”、 “虚症”范畴。 随着便秘发病率逐年上升，它已成为影响现代人们生活质量的常见疾病之一。其中肠神经系 统及肠神经递质的变化是慢传输型便秘 （STC）发病的重要机制之一。枳实通便汤具有健脾 理气燥湿消导通便之功，在临床治疗便秘上取得了一定的疗效。目的：研究枳实通便汤对慢 传输型便秘大鼠肠神经系统及肠神经递质的影响，探讨中药提高远期疗效的可能及机制。方 法：本研究利用大黄灌胃3月建立慢传输型便秘 （STC）大鼠动物模型，然后随机将便秘模 型分为模型组、中药高剂量组、中药低剂量组，中药高剂量组、中药低剂量组分别予生药枳 术通便汤2.4g/ml、1.2g/ml浓度灌胃给药，相当于临床用药剂量的6倍、3倍，模型组予生理 盐水20 ml/kg灌胃给药。每天1次，连续给药15天。给药完成后，采用墨汁推进实验测定大 鼠肠道传输功能，用RT-PCR方法测定结肠神经营养因子 （GDNF ）及一氧化氮合酶 （NOS ） 的表达。结果：与模型组相比，空白组、中药高剂量组、中药低剂量组墨汁推进长度及百分 比(黑染肠管长度/总长度)均有明显增高，差异显著，具有统计学差异 （P0.01 ），空白组、 中药高剂量组、中药低剂量组组间未有明显差异，造模成功。RT-PCR结果显示：空白组结 肠组织中GDNF一mRNA的表达明显高于模型组（P=0.015 ），中药高剂量组结肠组织中GDNF 一mRNA的表达高于模型组(P=0.016) ，差异具有统计学意义；中药低剂量组与模型组相比 （P=0.086 ）；中药高剂量与空白组相比无明显差异。空白组结肠组织中NOS一mRNA的表达 明显低于模型组 （P=0.030 ），中药高剂量组结肠组织中NOS 一mRNA 的表达低于模型组 （P=0.047 ），差异具有统计学意义；中药低剂量组与模型组相比 （P=0.607 ）。结论：枳术通 便汤对STC大鼠肠道传输有改善作用，其可以促进GDNF一mRNA表达，减低NOS 一mRNA 的表达，且高剂量的枳术通便汤对STC大鼠肠道传输、肠神经系统及肠神经递质的变化有明 显改善作用。其作用机制可能是通过提高结肠GDNF一mRNA表达，减低NOS一mRNA的表 达而促进肠道的动力。 关键词：慢传输型便秘(STC) ；枳实通便汤；肠道传输功能；RT-PCR 慢传输型便秘(slow transit constipation ,STC) 是一类胃肠道传输功能障碍的顽固性便 [1] 秘，以结肠传输减慢为特点 。随着便秘发病率逐年上升，它已成为影响现代人们生活质量 的常见疾病之一。肠神经系统及肠神经递质的变化是慢传输型便秘 （STC）发病的重要机制 [2 之一 ] ，运用外源性胶质细胞源性神经营养因子 （GDNF ）能促进肠壁神经元的修复，显著 [3] 改善STC 大鼠结肠的动力 ，但目前GDNF 对神经元的营养支持作用受到临床应用限制。 中医药在STC 治疗方面有较好的近远期临床疗效。研究表明枳实通便汤治疗便秘，在临床 [4] 上取得了一定的疗效 。本实验对枳实通便汤对 STC 肠神经系统及肠神经递质的变化进行 研究，探讨中药提高远期疗效的可能及机制。 一、实验材料及方法 1、STC模型的建立：SD成年清洁级大鼠 30只(由浙江中医药大学院动物中心提供)，雌雄各 半，平均体重(200±20)g。分为空白组 10只，造模组20只，中药组10只。造模组给予大 [3] 黄粉(浙江中医药大学附属第一医院中药房提供)灌胃，参照文献 和预实验结果，大黄起始 -1 -1 剂量为 200mg·kg·d，每只大鼠均以 0．9%氯化钠溶液 2ml稀释为药物混悬液，灌胃 1