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第二章 生物氧化(biological oxidation) 第一节 概 论 一、概念 生物氧化是有机物在生物体内氧化分解 为二氧化碳和水并释放能量的过程。 实际是需氧细胞呼吸作用中一系列氧化还原反应,因表现为细胞内O2 的消耗和CO2的形成,故又称组织呼吸、细胞呼吸(cellular respiration) 。 三、生物氧化中CO2生成方式 基本方式: 底物脱羧基作用 1. 单纯脱羧基作用(不伴随脱氢) 2. 氧化脱羧作用(伴随脱氢) 六、氧化-还原电势(电位) (一)概念: 六、氧化-还原电势 在标准条件(25℃,常压,[氧化型]/[还原型]:1mol)下,每一个氧化还原对都有一个标准氧化还原电势(E0); 生物体氧化还原反应的标准条件:pH=7,故用E0’表示,此时氢电极 E0’= - 0.421 (王镜岩P.117 表24-1) 六、氧化-还原电势(电位) (二)标准电势与自由能的关系: 七、参与生物氧化的酶类和电子载体 2.氧化酶:如细胞色素氧化酶、抗坏血酸氧化酶等 第二节 线粒体氧化体系 一、 呼吸链的概念 respiratory chain:由一系列递氢体和递电子体以及相应的酶系统按一定顺序排列在线粒体内膜上构成的一条长链(生物氧化还原链或称为电子传递链),因与细胞摄取氧的呼吸过程有关,故又称呼吸链。 二、线粒体内的两条重要呼吸链(分类:NADH 呼吸链和 FADH2 呼吸链) 呼吸链的概念 电子从NADH或FADH2到O2的传递所经过的途径,称为电子传递链,或称呼吸链。它是由一系列递氢体和递电子体以及相应的酶系统按一定顺序排列在线粒体内膜上的一条长链。主要由蛋白质复合体组成,大致分为四部分,即:NADH-Q还原酶、琥珀酸-Q还原酶、细胞色素还原酶和细胞色素氧化酶。 三、呼吸链的组成P329 呼吸链由一系列的氢传递体和电子传递体组成。 1. 以NAD+或NADP+为辅酶的脱氢酶 (尼克酰胺核苷酸类) 四、呼吸链中各组分的排列顺序P120 确定呼吸链中各递氢体或递电子体的排列顺序的实验方法有多种 1.测定各种电子传递体的标准氧化还原电位(E0′),依还原电位大小排列 2. 用分离出的电子传递体进行呼吸链复合物体外重组实验 2. 用分离出的电子传递体进行呼吸链复合物体外重组实验 3. 利用呼吸链的特殊阻断抑制剂,阻断链中某些特定的电子传递环节。 4. 用分光光度法测得各个传递体发生吸收光谱的变化 完整的线粒体当电子传递体处于氧化态时,悬浮液浑浊,光吸收不能直接测出;但当之处于还原态时,即可以氧化态为对照测出。游离的线粒体在有氧下进行电子传递时,NADH一端还原性最强,而靠近氧一端电子传递体几乎处于氧化态,由此判断电子的流向。当向完全处于还原状态的电子传递体中加入氧时,最先被氧化的是细胞色素aa3,其次cytC, cytC1,cytb, 最后是NADH。 二、 ATP的生成方式 确定氧化磷酸化偶联部位(ATP生成部位)的实验方法 2) 电位变化测定 氧化磷酸化偶联部位 三、氧化磷酸化的作用机制 化学偶联假说(高能共价中间物?) 构象偶联假说(构象变化?) 化学渗透假说(1961年,英国Mitchell) 化学渗透假说基本要点: 化学渗透假说基本要点: Unlike the tight and loose forms, the open form of the β subunit can change conformation sufficiently to release bound nucleotides. The rotation of the γsubunit interconverts the three βsubunits. The subunit in the T (tight) form, which contains newly synthesized ATP that cannot be released, is converted into the O (open) form. In this form, it can release ATP and then bind ADP and P to begin a new cycle. The α3β3 hexamer of ATP synthase is fixed to a surface, with the γ subunit projecting upward and linked to a fluorescently labeled actin filament. The addition and subsequent hydrolysis of ATP res
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