环孢霉素A通过ROS-Cyclophilin A-ERK12信号途径抑制人脐静脉内皮细胞与中性粒细胞粘附.pdfVIP

生理学报 Acta Physiologica Sinica, June 25, 2004, 56 (3): 313-320 313 生理学报 Acta Physiologica Sinica, June 25, 2004, 56 (3): 269-274 周四桂等: 环孢霉素A 通过 ROS- Cyclophilin A - ERK1/2 信号途径抑制人脐静脉内皮细胞与中性粒细胞粘附 研究论文 环孢霉素 A 通过 ROS-Cyclophilin A-ERK1/2 信号途径抑制 人脐静脉内皮细胞与中性粒细胞粘附 周四桂，徐立朋，廖端芳*，雷小勇，严奉祥，朱炳阳 南华大学药物药理研究所, 衡阳 421001 摘 要: 为研究环孢霉素A (cyclosporin A, CsA)对缺氧/ 复氧诱导人脐静脉内皮细胞 (ECV-304)与中性粒细胞粘附的影响, 本工 作以缺氧/ 复氧诱导粘附为模型, 采用 β-N- 乙酰氨基己糖苷酶比色法检测粘附率, 流式细胞术检测ECV-304 细胞表面粘附分子 E- 选择素(E-selectin)﹑细胞间粘附分子-1 (ICAM-1)的表达, Fenton 反应测定活性氧(reactive oxygen species, ROS)的含量, West- ern-blot 法检测 ECV-304 细胞亲环素A( cyclophilin A, CyPA) ﹑磷酸化及总细胞外信号调节激酶(ERK1/2)蛋白的表达。结果发 现, ECV-304 细胞经缺氧/ 复氧处理后, ROS 释放增多, E-selectin ﹑ICAM-1 的表达上调, 其表面中性粒细胞的粘附增加, CsA 能 显著抑制缺氧/ 复氧的上述作用。缺氧/ 复氧后, CyPA 蛋白表达明显上调, ERK1/2 显著活化, 细胞总ERK1/2 蛋白表达无明显 改变。CyPA 抑制剂 CsA 以及CyPA 反义寡核苷酸均明显减轻缺氧/ 复氧诱导的ERK1/2 激活, 显著减少ECV-304 细胞与中性 粒细胞粘附。ERK1/2 信号通路特异性阻断剂 PD98059 亦显著抑制 ECV-304 细胞与中性粒细胞的粘附。上述结果提示, CsA 抑制缺氧/ 复氧诱导的ECV-304 细胞与中性粒细胞粘附, 并可能通过抑制ROS-Cyclophilin A-ERK1/2 的信号转导途径实现。 关键词: 缺氧; 细胞粘附分子; 环孢霉素A; 亲环素A; 细胞外信号调节激酶 中图分类号: Q463; R542.2 Cyclosporin A inhibits the adhesion of neutrophil with ECV-304 induced by hypoxia/ reoxygenation via ROS-Cyclophilin A-ERK1/2 pathway * ZHOU Si-Gui, Xu Li-Peng, LIAO Duan-Fang , LEI Xiao-Yong, YAN Feng-Xiang, ZHU Bing-Yang Institute of Pharmacy and Pharmacology, Nanhua University, Hengyang, Hunan 421001 , China Abstract: To investigate the inhibition of cyclosporin A (CsA) on neutrophil adhesion to human umbilical vein endothelial cells (HUVECs, ECV-304) induced by hypoxia/reoxygenation and further explore its mechanism ， a 1 h hypoxia/4 h reoxygenation model was reproduced using ECV-304. The adhesion rate of neutrophils to ECV-304 was determined by measuring the activity of endogenous hexosaminidase. The expression of end