低氧促进C2C12细胞增殖及相关机制探讨.pdfVIP

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胞仪(FACScalibllr型,Becton Dicki盥on公司)检测并分析结果. 氟细胞HlF-I蚋RNA检测 s— ATCAGCCAGCAAGTCCTT CTTA(怒AGTGGTcGT CT.-3,5-TGC T一3,扩增长度518bp. 以18s TGGTTCC订TGGTCG cDNA引物序列作为内参照,其序歹吐为。5玎TA TGGTAGCCGTTTCTCAG·3;扩增长度为355 94℃5删n,94℃45s,61℃458,72℃45 上电泳,用UVP凝胶隔像成像系统扫描定性并摄像咆泳条帮的灰度,以确定扩增物的相对量. 7.细胞H胁l伍蛋白检测 荆盆(Nuclear.cyto蝴lExt豫ct白n 片、拍照. 8.统计学分析 奉均数比较的l检验。 二、结果 1.细胞计数结果 (PO.001.图1). 盔莲n∞20% 嗣H,Io% ^.0虿v皤蘸鬣罂器再 弘h 48h 72h 豳l低氧对Gcl:缃孢敛誊的影响 氛生长曲线 由生长曲线可知。1d后细胞进入对数生长期,低氧曲线上升速率显著大干常氧曲线,且高峰前移, 提前(5d时)进入平台期,说明低氧组细胞多子常氧维,提静发生生长抻制(圈2). ·70· ●e∞20% £ --●-h,lO% 邑 捌 妊 锲 罂 鲤 焉 ld 2d 3d 4d 5d 6d 7d 闰2低氧对Gc1。细胞生长曲线的影响 3.细胞周甥分析结果 细胞增殖指数无明显差异(翻3). 12h 24h 36h ^ 殳 量 謇 是 嚣 一 C∞20睇 暑 鲁塞 鼍詈 U 童墨 童塞 定 2 , ■ ■ 。 0 100C

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