④低频电磁场对成骨细胞增殖和细胞周期的影响.pdfVIP

第舛 卷 第 ∞ 期 斜 辱 屯 耘 ④低频 电磁场对成骨细胞增殖及细胞周期的影响 7 7L ……… ㈨ … ． 翟、j『／， 摘要 鼠的原代成骨细胞，ROS成骨样细胞受 50Hz低频 电磁场作用 后，应用 m 方击和 。 沆式细胞术，检测细胞的增殖 、细胞周期卸细胞凋亡崎况 结果表 明：低频 电磁场作用后的细 胞 ，与对照组细胞相 比，细胞数 目增 多，S期细穗百分 匕增高，凋亡 比例减少 ．说 明低频 电磁 场的圭物学效应 曲一个重要方面表现在对细胞增殖 、细胞周磐的影响上． 羌键词!塑皇竺 生物学效应 塑 ．塑些竺 戚箭钽月 我们生活 的空间中存在着各种 电磁场 ．近年来 ，对 电磁场生物学效应 的研究 日益 引起人 们 的关注 ．一些病理学上的研究发现 ，高压输 电线周 围的居 民癌症 的发病率较高可能与 电磁场 的辐射有关 与此同时，人们又发现 ，一定强度 的低频交变或脉冲电磁场能够促进 患者骨折 的愈合 J，医学上还常常将 电磁场 (如高频 电磁场)的热效应用于组织疼痛 的透热疗 法和肿瘤的高温治疗，但是 电磁场的作用机理还不很清楚 ，电磁场 的一些生物学效应 尚无被 广泛接 受 的机理解 释 低频 电磁场促进骨折愈台，可能的原因是低频 电磁场对成骨细胞有一定的影响．本文利 用 Helt~qoltz线圈产生的低频交变 电磁场作为模拟生活中的电磁场 ，来研究低频 电磁场对成骨 细胞增殖的影响，并初步探索 了对成骨细胞周期的影响． 1 材料与方法 (1)细胞培养 ． 鼠的原代成骨细胞取 自SD乳 鼠的颅骨 ，用含 l0％胎牛血清 (GIBCO BR]公司)的 “一MEM培养液培养于 37屯，5％ c01培养箱中 ROS成骨样细胞 (北京协和医科 大学周学瀛教授赠)也用 “，MEM 培养液培养 ．2～3d换一次液 ． (1I)低频 电磁场的产生． 低频交变 电磁场作用装置 由两部分组成 ．一部分是交变 电流 发生部分 ，能够产生频率 0—1MHz可调 ，电流 0—06A可调 的正 弦交 变 电流 ；一部 分是 Heh~oltz兹线圈．Helmholtz线圈由2个平行且共轴的圆线圈组成 ，且其线圈间距 。等于线圈 半径R 当在 2个线圈中通 以同方 向电流 时 ，则其总磁场在轴的中点附近的较大范围内是 均匀的 ，为 ：B= 0‰ 1／2R，其 中 n=4n×10 H／m为真空磁导率 ，本实验 中，线 圈 = 10，9cm．每个线 圈匝数 Nn=500，则 B=2．88，(mT)，因为在 电磁场促进骨折愈合 的实际应 用 中．其 电磁场强度在 n仃量级左右 ，因此在下面 的实验 中我们通 以0．4A交变 电流 ，产生 I15mT的电磁场 ，对成骨细胞进行作用 (…)低频 电磁场 -f细胞 的作用 ． 细胞在培养瓶或培养板 中贴壁培养 ，当细胞生长处于 对数生长期时，将培养瓶或 培养板放置于 Hehnholtz兹线 圈中，使底部处于线 圈中心轴平面 卜．两线 圈串联 ，并通 以50Hz，0，4A的电流 ，作用 30min后切断 电源 ，对照组细胞不加低频 电磁场作用 ，细胞继续培养～段 时间后 用 m 方法检 测细胞增殖情 况 ，或 用流式细胞 术 (1qov,Cytomet~．FCM)测定细胞周期 ． (1v)Mlrr方法 枪测细 胞存 活数 ． MTI(3一l4．5-Dimethyhhioazol一2一y1]一2．5-diphenyltet~n． 第 44卷 第 ∞ 期 钭 抠 zoliumbromide，Thiazolvlblue)法测定是一个快速简便 的颜色反应 的测定 【10．其原理是哺乳类 动物细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将黄绿色的~ITI降解成蓝紫色的甲膳 ，再用酶联免疫 检测仪测定 甲腊 的含量就可以定量测定细胞 的存活总数 ． 测量之前需先做 MTF的标准 曲线 ．将细胞按一定数 目接