基于流式细胞分析技术茯苓基因组大小测定.pdfVIP

世界科学技术— 中医药现代化★专题讨论：中药资源研究的前沿技术 基于流式细胞分析技术的茯苓基因组大小测定＊ □王亚之＊＊ 李秋实 陈士林 孙 超 宋经元＊＊ 中国医学科学院 （ 药用植物研究所 北京 100193） 北京协和医学院 摘 要：目的：茯苓是担子菌多孔菌科的著名传统中药。本研究的目的在于测定茯苓的基因组大 [1] 小并考察了其倍性与基因组的关系。方法：真菌材料的前处理参考文献报道 ，并用DNA 特异性染料 碘化丙啶进行染色，通过调节离心转速、染色时间等条件对样品进行核分离的优化。DNA 含量用流式 细胞仪进行分析，通过比较茯苓与内参黑曲霉G /G 期峰比值计算得出。结果：茯苓的基因组大小测 0 1 9 定为55.79±3.03Mb ，或相对DNA 含量为0.12±0.01pg （1pgDNA=0.965× 10 bp）。在结果中可以检测出黑 曲霉和茯苓的G /M 期峰。结论：本研究探索了用流式细胞仪分析茯苓基因组大小的方法，所得数据可 2 为基因组学研究提供了参考。 关键词：茯苓 基因组大小 流式细胞术 黑曲霉 doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2010.03.029 茯苓为我国传统常用菌类药材，别名松腴、松 究的深入开展，有助于人们了解真菌的生理特性、进 薯，《中华人民共和国药典》2010 版收载的茯苓来源 化和代谢多样性。目前，已测序真菌大部分集中于重 于多孔菌科（Polyporaceae）、卧空菌属（Poria）真菌茯 要的人类病原菌、植物病原菌、腐生菌或者模式生 苓Poria cocos （Schw.）Wolf 的干燥菌核。野生茯苓多 物，药用真菌范围尚属空白。药用真菌在我国资源丰 分布于北纬 18°~37° 、东经98°~121° 之间的亚热带、 [6] 富，有临床药用基础的真菌近300 种 ，近年来建立 [2] 热带 ，其作为经济型真菌在我国已有2000 多年的 的DNA 条形码鉴定系统，对药用植物和药用真菌的 [3] [7~9] 栽培历史 。茯苓作为传统中药应用已久，具有利水 正确鉴定提供了强有力的工具 。本研究以茯苓作 渗湿，健脾宁心等功效，《神农本草经》将其列为上 为药用真菌基因组学研究的开端，对其基因组大小 [4] 品。现代药理学研究表明 ，茯苓具有抑制肿瘤、抗 测定方法进行探索。 炎、调节免疫等作用，具有广阔的开发前景。 测定基