诱导多能干细胞的体细胞重编程方法和应用前景.pdfVIP

《生命的化学》2010年30卷3期 ● 小综述 · 387 · CHEMISTRY OF LIFE 2010，30(3) 文章编号: 1000-1336(2010)03-0387-04 诱导多能干细胞的体细胞重编程方法与应用前景 吴 南 冯 华 第三军医大学西南医院神经外科，重庆 400038 摘要：体细胞重编程(somatic reprogramming)是指已分化的体细胞在特定条件下，其生长和发育的程序重新转变，成 为另一型细胞，特别是恢复到全能性状态，逆转成诱导多能干细胞 的过程。多能 干细胞能在体内外分化成几乎所有类型的细胞，具有很高的理论研究价值。将已分化的人体细胞程序重排为多能 状态可以产生对病人和疾病的特异性干细胞。本文介绍用转录因子的异位表达，介导产生诱导多能干细胞的方法 和可能的危险性以及有较高安全性的 “2A肽法”。目前，iPS技术还未进入临床应用，但已有一些有希望的尝试。 关键词：诱导多能干细胞(iPS)；体细胞重编程；转录因子异位表达；2A肽法 中图分类号：Q291 体细胞重编程是指已分化的体细胞在特定条件 成为iPS，呈现胚胎干细胞的特征。这种iPS可用于 下，生长和发育程序重新转变，成为另一型细胞，特 制造新的疾病模型、对药物研究和移植医学具有重 别是被逆转成诱导多能干细胞的过程。多能干细胞 要的应用价值。从人体活检取得标本开始到完成重 [5] 类似原始胚胎干细胞，能自我更新，在体内外能分 新编程约需两个月时间 。应用不插入宿主基因组 化成几乎所有类型的细胞，在再生医学等领域有巨 但短时表达重组Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc的腺病毒 大的应用潜力。体细胞核重新排序实际上是指将一 也能够将小鼠的成纤维细胞和肝细胞诱导成多能干 种细胞的基因表达转换为另一种类型的基因表达的 细胞。这种腺病毒诱导多能干细胞(adeno-iPS)，能表 [1,2] 过程，是生物学和医学领域中的重大突破 。本文 达内源性多能性基因、形成畸胎瘤和许多不同的组 就其研究方法和应用前景的进展作一简要介绍。 织，为产生和研究病人特异性干细胞提供了好的方 1. iPS的制备方法 法。 1.1四个转录因子的方法 1.2排除应用病毒为运送载体的方法 用Oct3/4、Sox2、Klf4和c-Myc这四个转录因子 最初尝试用病毒作为载体，是用其运送程序重 可从成人皮肤成纤维细胞产生iPS，也可从小鼠的体 排因子。用这样产生的iPS细胞进行治疗，由于有许 细胞产生iPS，并在种系中传播下去。iPS在形态学、 多前病毒的整合体，可能有插入突变的危险。例如， 增殖、表面抗原、基因表达、多能细胞特异性基因 在早期研究中，科学家需要用4个独立的病毒(每个 的表观遗传状态以及端粒酶活性方面都和人胚胎干 病毒对应1个重组基因)才能将四个转录因子(Oct4、 [3] Sox2、c-Myc和Klf4)的基因转移到细胞的DNA中。这 细胞相似 。将体细胞核转移至哺乳动物卵母细胞 中，可使细胞中的反式作用因子将该体细胞核重新 4个基因一旦被激活，细胞将会从成年状态分化成