微生物工程第十章 发酵过程的中制-3.ppt

第四节 补料的控制 1、补料的概念：在发酵过程中补充某些养料以维持菌的生理代谢活动和合成的需要。 2、补料的目的 解除基质过浓的抑制； 解除产物的反馈抑制； 避免分批发酵中一次投料过多造成细胞大量生长，耗氧过多而导致供氧不足； 3、补料方式 定时流加：早期方法；效果不大； 连续流加 变速流加 4、补加成分和时机 （1）补糖：过早加糖，有可能刺激菌丝的生长，过迟则起不到应有效果； ①以还原糖作为控制指标： 先多后少； ②以总糖作为指标： 前期：少量多次，控制总量5%~6%； 中期：保持半饥饿状态，残糖控制在4％~5%； 后期：残糖在3％~4%；放罐在2％左右。 （2）补氮：主要起着补充菌体的无机氮源和调节pH值的作用。 （3）如遇生长迟慢、耗糖低，补具有调节生长代谢作用的物料 5、补料尺度：中间补料的数量为基础料的1-3倍 6、补料效果 自溶期推迟，生物合成期延长； 控制生长速率，有利于提高细胞密度和发酵产率； 7、在补料中应注意以下几个问题： 料液配比要适合，过浓会影响到消毒及料液的输送，过稀则其料液体积增大； 应注意加强无菌控制，对设备和操作都必须从严掌； 应考虑经济核算，节约粮食，注意培养基的碳氮平衡等。 本章作业 温度对微生物生长和产物积累分别有哪些影响？怎样选择最适温度？ 请简要说明发酵过程中pH值变化的原因以及pH值变化对微生物生长和产物合成的影响。 以补糖为例说明补料控制的意义、原理和方法。 （1）罗氏假说 1941年哈金斯（Harkinss W.D）曾提出铺展系数S的概念， 即：S=σF－σFA－σA σF——起泡介质的表面张力 σFA——消泡剂与起泡介质的界面张力 σA——消泡剂的表面张力 以铺展系数S值的正负判断消泡剂是否能够在泡沫上扩展。 σA σFA σF 1948年鲁宾逊（Robinson,J.V）和伍兹（Words,W.W）提出了浸入系数E的概念，即 E= 以浸入系数E值的正负判断消泡剂能否进入泡沫表面。 σA σFA σF 美国胶体化学家罗斯（Ross,S.），四十年代初就开始研究泡沫问题，对添加了各种表面活性剂的起泡体系，进行试验和观察，寻找消泡剂在起泡液中溶解性与消泡效力的对应关系。罗斯提出一种假说：在溶液中，溶解状态的溶质是稳泡剂；不溶状态的溶质，当浸入系数与铺展系数均为正值时即是消泡剂。 罗斯认为，消泡剂的分子团，即一小滴，一接触泡沫，首先便是浸入，之后在泡沫上扩展，局部变薄而破裂。当浸入系数和铺展系数均为负值时，小滴既不浸入也不扩展；当浸入系数大于零，铺展系数为负数时小滴成棱镜状，不铺展；只有二者均为正值时才可能是消泡剂，这种假说为消泡剂作用机理奠定了基础。 （2）与稳泡因素有关的几种消泡机理 a、消泡剂可使泡沫液局部表面张力降低，因而导致泡沫破灭 希勒（Shearer,L.T）和艾克斯(Akers,W.W.)在油体系中研究聚硅氧烷油的消泡过程。他们对泡沫体系以1/1000秒的速度连续拍照，照片放大100倍 由图可以看出，硅油微粒到达泡沫表面使泡沫破灭，气泡合并，气液迅速分离。研究发现：低浓度的，表面张力比起泡液低的物质，如果与起泡液成为均相，则促进起泡；如果呈饱和状态，而且被均匀分散在起泡液中，就可能有消泡作用。附着了消泡剂小滴的泡沫能够迅速破灭，与局部降低表面张力有关。 日本高野信之提出类似的观点：在起泡液中分散的消泡剂颗粒，随着泡沫液变薄，露到表面，因消泡剂表面张力比泡沫液低，该处受到周围的拉伸、牵引。不断变薄，最后破灭。 把高级醇或植物油洒在泡沫上，当其附着到泡沫上，即溶入泡沫液，会显著降低该处的表面张力。因为这些物质一般对水的溶解度较小，表面张力降低只限于局部，而泡沫周围的表面张力几乎没有发生变化。表面张力降低的部分，被强烈地向四周牵引、延展，最后破裂。 b、消泡剂能破坏膜弹性而导致气泡破灭 稳泡因素中谈到，因泡膜表面吸附表面活性剂，具有“吉布斯弹性”，当受到外部压力时有自愈作用。 消泡剂能破坏泡膜的这种弹性。离子型表面活性剂水溶液产生的泡沫，是因为表面活性剂定向排列形成双电层，借助排斥作用阻碍泡沫合并而使泡沫稳定。这种性质的泡沫，只需向体系中加入一种离子电荷相反的表面活性剂，甚至本身也是助泡剂，就可降低泡沫稳定性。这是因为两种表面活性剂彼此干扰，妨碍在气液界面上定向排列，破坏了膜弹性，因而产生消泡作用。 C、消泡剂能促使液膜排液，因而导致气泡破灭 泡沫液厚泡沫弹性好，自愈效应强；泡膜排液速率反映泡沫的稳定性。起泡体系的粘度越高，排液速度越低，如蛋白质溶液，肽链之间能够形成氢键；有些表面活性剂能与水分子形成氢键，能减少泡沫中的排液，起到稳泡作用。 加入不产生氢键的表面活性剂，取代产生氢键的表面活性剂，就可以使排液加快