经冷冻冻干及辐照的异体动脉移植的实验研究.pdfVIP

经冷冻、冻干及辐照的异体动脉移植的实验研究1 1 2 2 2 2 2 郑宁刚 ，刘兴炎 ，葛宝丰 ，薛云 ，高明暄 ，周胜虎 1. 兰州大学临床医学院，兰州（730050 ） 2. 兰州军区兰州总医院，兰州 (730050) 摘 要：目的 研究冷冻、冻干及辐照同种异体动脉和异种动脉移植于兔股动脉后的通畅率、 组织病理学变化，探讨物理方法处理后同种异体血管移植的可行性。 方法 健康青紫兰兔 36 只，随机分为A 、B 、C 3 组，每组各 12 只兔子。手术切除股动脉2cm,分别用自体新鲜 动脉血管、冷冻加冻干加辐照兔和小型猪股动脉 2cm 移植于缺损处，均采用端端吻合，术 后观察通畅情况，术后 3 月切取移植血管，分别作光镜、扫描电镜检查。 结果 术后 3 月，A 组（自体血管移植组）移植血管通畅率为 100%，B 组（同种异体血管移植组）为91.7% ， C 组（异种血管移植组）为25%；同种异体组与自体组比较，P ﹥0.05,无统计学意义。异种 血管组与自体组、同种异体组比较，皆P ﹤0.05,有统计学意义。 结论 经冷冻加冻干加辐 照处理的同种异体血管移植在不用免疫抑制剂的情况下是可行的；但同样方法处理的异种血 管移植由于血管免疫原性消除效果差，移植血管通畅率不高，要应用于临床还需进一步的研 究。 关键词：冷冻；冻干；辐照；动脉；移植；显微外科 临床上大段血管缺损造成的肢体坏死越来越多，战争中的大肢体血管损伤在最近几次战 争报道中也呈上升趋势⑴，寻找一种重建大血管、恢复四肢血液循环的方法成为许多临床和 科研工作者的迫切需要。异体血管移植重建肢体血液循环成为研究的热点。异体血管移植包 括同种异体血管移植和异种血管移植。本实验旨在对同种异体血管和异种血管采用相同的处 理方法后，移植于受体，观察其不同时段的通畅率和组织病理学变化，探讨物理方法处理后 同种异体血管和异种血管移植的可行性。 1. 材料和方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物 3～6 月龄，体重3.5～4.5kg 的健康青紫蓝兔（购自兰州生物制品研究所）。 1.1.2 药品与试剂 DMEM 培养基（美国Gibco 公司），小牛血清（兰州民海生物工程有限公司），二甲基亚 砜（Sigma 公司），肝素钠注射液（天津市生物化学制药厂），罂粟碱注射液（沈阳市第一制 药厂），速眠新Ⅱ注射液（军事医学科学院长春军事兽医研究所），硫化钠（天津市巴斯夫化 工有限公司） 1.1.3 主要仪器设备 CO2 培养箱 （Heraeus Germany ） 超净工作台 （苏州净化设备有限公司） 冷冻干燥机 （军事医学科学院实验仪器厂） 显微外科器械 （上海医疗器械有限公司） XTS-4A 型手外科手术显微镜 （镇江中天光学仪器有限责任公司） 1本课题得到全军十一五重点课题战伤三级救治（NO.06G033 ）的资助。 - 1 - 1.2 实验方法 1.2.1 异体血管的制备与处理 将健康青紫蓝兔和小型猪分别用 10%硫化钠溶液脱毛，速眠新Ⅱ注射液按0.1ml/Kg 体重 肌肉注射麻醉，仰卧于手术台上，消毒、铺巾，切开皮肤、皮下，分开肌肉，找到股动脉， 在显微镜下小心地仔细分离股动脉，切取股动脉无分支段，每段约 2.5cm～3cm，立即置于 肝素生理盐水中，冲净管腔淤血，移至超净工作台，在一次性培养皿中加适量DMEM 液和 U 后，将血管置于培养皿中，移至CO 培养箱培养24h ， 小牛血清，加青霉素、链霉素