药用植物束花石斛流苏石斛及其形态相似种的PCRRFLP鉴别研究.pdfVIP

维普资讯 · 728· 药学学报 ActaPharmaceuticaSinica2005，40(8)：728—733 药用植物束花石斛、流苏石斛及其形态相似种的PCR-RFLP鉴别研究 张 婷 ，徐珞珊 ，王峥涛 ，周开亚 ，张 宁 ，史永峰 (1．中国药科大学 生药学研究室，江苏 南京210038；2．南京师范大学 生命科学学院生物资源技术江苏省重点实验室 ， 江苏 南京 210097；3．云南金陵植物药业股份有限公司，云南 思茅 665000) 摘要：目的 建立简易的采用rDNAITS区作为分子标记对中药石斛的基源植物进行分子鉴定的技术。方法 用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性 (PCR—RFLP)方法获得 ITS 片段的限制性图谱。束花石斛及其形态相似种 的PCR扩增产物用ClaI和ApaLI酶切 ，流苏石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用 SphI酶切。结果 根据预测 的PCR—RFLP图谱 ，可以鉴别药用植物束花石斛、流苏石斛及它们的形态相似种。用这种方法鉴定了市场上收集的 25件商品束花石斛 、流苏石斛新鲜药材的原植物。结论 rDNAITS 的PCR—RFLP可用于鉴定石斛药材的原植物，具 有简便 、费用低的优点。 关键词：石斛；束花石斛；流苏石斛；ITS 区；PCR—RFLP 中图分类号：R282．71 文献标识码：A 文章编号：0513—4870(2005)08—0728—06 M olecularidentification ofmedicinalplants：Dendrobium chrysanthum ， Dendrobiumfimbriatum andtheirm0rph0l0gicallyalliedspeciesby PCR-RFLP analyses ZHANG Ting ，XU Luo—shan ，WANG Zheng—tao ，ZHOU Kai—ya ， ZHANG Ning ．SHIYong—feng (J．DepartmentofPharmacognosy，ChinaPharmaceuticalUniversity，Na ng210038，China； 2．JiangsuKeyLabforBioresourceTechnology，CollegeofLfieScience，Na ngNormalUniversity，Nanjing210097，China； 3．YunnanJinlingPharmaceuticalCompanyLimited，Simao665000，China) Abstract：Aim Toestablish asimplemethod formolecularidentification oforiginalplantsofD． chrysanthum andD． mbriatum usingmolecularmarkerrDNA ITSregion．Methods Restrictionpatterns ． ofITSfragmentswereobtainedusingPCR．RFLPmethod．ThePCR productsofD．chrysanthum and its morphologicallyalliedspeciesweredigestedat37 ℃ byClaIandApaLI，thoseofD．mbriatum andits moprhologicallyalliedspeciesweredigestedbySphI．Results D．chrysanthum．D．fi