报告基因技术的理论基础及其应用.pdfVIP

报告基 因技术 的理 论基础及 其应 用 刘 志锋 姜 勇 △ 第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室 , 广州 巧 要 因 泛 用 监 细 因 , 元 摘 报 告基 技术广 地 应 于 测 胞 的信 号转导和 基 表达 通 过把转录控制 件 剪接 到 , 。 、 、 “ ” 报告基 因 可 以直观 地 报道 细 胞 内与基 因表达 有关 的信号级联 这 种检测具有敏感性高 方便 可 而且 适用 于大规模检测 优 点。 随 报 告基 因 术及 检测 方法 的不 , 光 、 绿色 靠 等 着 技 其 断改进 荧 素酶 以 无 工 , 细 因 荧光蛋 白 及 新近 克 隆 出的红 色 荧光蛋 白作 为 害性 的检测 具 将在检 测 活体组 织和 胞 基 表达 方面得到越来越广 泛 的应用 。 此 外 , 在研 究疾病发生 的分 子机制 , 基 因治疗和 药物开 发方 面 , 报 告基 因技术也将发挥 出重 要作 用 。 本文对报 告基 因技术 的基 础 理论 、 常用 报告基 因的种 类和 特 点, 以及 其 目前 的主要应用作 了概括性介绍 。 关键词 报告基 因 荧光蛋 白 信号检 测 基 因表达 学科分类号 。 细胞外刺激 如 多肤 、 类 固醇激素 、 细胞 因子和 因的表达必须不改变受体细胞或生物 的生理活动 神经递质等 与细胞表面或细胞 内的受体相互作用 二 、 报告基 因的类型及特 点 可 引 一过 , 活 列 因 , 一 氯霉素 乙酞 转移酶 氯霉 素 乙酞基转 发 性信号 激 一系 转录 子后 最终使 基 基 因表达发生变化 。 通过将反应元件连接到报告基 移酶 , 作为 。 因 , 然后有选择地检测报告基 因表达产物 即可检测 报告基 因最早主要用 于监测 细胞基 因 的转录活性 到相应信号级联反应 的活性及它们在细胞 内基 因表 它是一种原核生物 蛋 白合酶 的抑 制剂 , 可使 乙酞基 达和调控方面 的作用 。 报告基 因 的种类很 多 , 其应