我国弓形虫分离株SAG3基因的比较及其毒力的分析.pdfVIP

我国弓形虫分离株sAG3基因的比较及其毒力分析 王林u，沈继龙1，黄开泉2，宋晓蓉3，徐修才3，余莉1，罗庆礼1，陈兆武1，霍星星1， 蔡亦红1，张爱梅， [摘要] 目的探明流行我国刚地弓形虫(胁印拯m口纠硪f)基因型分布及其对小鼠毒 力，观察我国强毒株在感染小鼠体内的动态分布，以期为我国刚地弓形虫种群进化研究和弓 形虫病的诊断防治提供思路。 方法采用PcR．RFLP和DNA序列分析对来源于国内不同 地域的12株刚地弓形虫以及基因型I、II、III型虫株的SAG3基因进行比较分析；弓形虫 TgC 染SPF级IⅢ小鼠，观察小鼠的存活率和死亡时间；同时取TgC柳h3感染小鼠，于感染后 第2、4、6、8天，荧光定量PcR方法检测弓形虫在血液、心、肝、脑和淋巴结组织中的动 态分布。 结果来源于国内不同地域的12株刚地弓形虫SAG3经PCR。I心LP分型只显示 I 为一种带型，与基因III型虫株一致；sAG3基因序列分析显示我国12个弓形虫虫株的Nci 酶切位点与国外报道的VEG株一致，同属于基因III型，与PcR．RFLP分析结果结果相吻 合。除酶切位点外， 比对分析发现，不同基因型弓形虫株SAG3基因有个别碱基的差异，可能为地理隔离所致的 KM小鼠，小鼠于5一10天内死亡，腹腔冲洗液涂片可见大量速殖子，为强毒株；弓形虫 TgCa似hl和TgC咖h6速殖子经腹腔感染KM小鼠，小鼠只出现一过性的炎症反应，存活 小鼠脑组织压片可见大量包囊，为弱毒株。感染后第2天，TgCa铆h3虫体即出现在淋巴结 著增多(尸0．05)，第8天达到高峰(7．75士0．299)；心和脑组织中虫体量各时间点之间没 有显著性差异(尸o．05)，并以恒定水平持续到实验结束。结论我国刚地弓形虫具有有 限的基因型，即使在相同的基因型内也存在不同毒力的虫株；弓形虫强毒株经腹腔感染KM 小鼠，虫体首先侵入腹腔内器官，然后通过血液循环到达全身各器官。 [关键词】刚地弓形虫；基因型；毒力；DNA序列分析 }国家重点基础研究发展计划(973计划)(No．2010cB530001) 通讯作者：沈继龙，E-mail：shenjilon953@126．com 作者单位：1安徽病原生物学省级实验室，人兽共患病安徽省重点实验室，安徽医科大学病原生物学教研 室，合肥230032； 2安徽中医学院第一附属医院检验中心，合肥23003l； 3安徽医科大学附属省立医院 115 of Geneandmouse—Virulence studiesonSAG3 Conlparative fromChina 7却^醛册口gD刀d豇isolates Xiu—cail，YULil， wANG xiao．ron91，xu Lilll，2，s旺NJi．10n91，HUANGKaⅫaJl2，soNG LU0 Zha伊wul，HUOXing-xin91 Qing—lil，CⅢN (iDep甜钾n￡nt《P甜asitolo斟．Provincial 2CZ加fc厨 23DD32，C南加口i 三口6Dm幻砂Q厂ZDD门DsPs么，2|i2“f，彳，z矗“f施疥c口f渤iVP船i钐日咖f First ChineseMed{cine，