血液筛查中丙型肝炎病毒抗体检测与核酸检测联合应用与探讨.pdfVIP

第五届中国病毒性肝炎与艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛 血液筛查中丙型肝炎病毒抗体检测与核酸检测 联合应用的探讨 何亚琴 张建伟 杨爱龙 作者单位：213004 常州市中心血站 通信作者：何亚琴，电子信箱：hyq303@ 丙型肝炎病毒（HCV ）是输血后肝炎的致 二、试剂与仪器 病因子之一，主要经血或血制品传播。HCV 感 抗-HCV ELISA 检测试剂为国产试剂（上海 染极易呈慢性化，甚至可导致部分患者肝硬化或 科华生物工程股份有限公司、英科新创科技有限 肝癌。输血后肝炎中 90%为丙型肝炎。目前国 公司）。HCV 核酸的提取试剂和检测试剂为罗氏 内大多数的采供血机构应用酶联免疫吸附试验 诊断公司的产品。Freedom evoclinical 全自动加 （ELISA ）检测抗-HCV，然而抗-HCV 检测存在 样仪（TECAN ）；FAME 酶免分析仪；低速离心 感染窗口期的问题，核酸扩增技术（NAT ）由于 机 （ KCD ） ； M PR 1410R 冰 箱 能够大大缩短 ELISA 法检测的窗口期，因此在 SANYOLABCOOL ）。核酸检测系统采用罗氏 （ 多数发达国家中已经广泛应用[1] 。但是由于检测 诊断 Cobas S201 全自动核酸提取、扩增检测系 原理与方法学的不同，核酸检测并不能完全替代 统。 ELISA 。本中心是卫生部确定的开展核酸检测试 三、检测流程 点的采供血机构之一，就 HCV 的血清学检测和 当日完成二遍 ELISA （国产试剂）检测， 核酸检测结果报告如下，并探讨两者联合应用的 次日上午 NAT 检测和 ELISA 复查同时进行。酶 意义。 免阴性、单阳复查标本随机混合后用 NAT 法检 测，酶免双阳标本做单标本 NAT 检测。将酶免 材料与方法 单试剂阳性、核酸检测阳性的标本送至卫生部临 一、标本来源 检中心确证。 2010 年 6 至 12 月本站共收集无偿献血者标 四、抗-HCV 检测和核酸检测 本 24546 份。所有固定采血点配备水平离心机， 每份无偿献血标本采用两种 ELISA 试剂进 采血结束后立即由采血人员完成对每位献血者 4 行抗-HCV 检测，每批实验均设有室内质控品、 管标本的留取：分离胶促凝真空采血管（1 管 5ml ） 空白对照、阴性对照和阳性对照。结果判断标准： 用于酶免四项、ALT 检测；带分离胶 EDTA-K2 S/CO≥1 为阳性（血液检测结果判为不合格）， 抗凝真空采血管（1 管 5 ml、1 管 8 ml）用于核 0.5 ＜S/CO＜1 为灰区（血液检测结果判为不合 酸检测；同时记录采集日期、样品编码等信息。 格），S/CO＜0.5 为阴性（血液检测结果判为合 所有标本均在2 小时内经过离心后保存于2～8℃ 格）。 的冰箱；流动采血点采血人员完成对每位献血者 核酸检测采用混合检测。每个一级混样池 4 管标本，2～3 h 内取回站部，与检测中心交接 （pool ）包含6 份标本，全自动混样仪加样，每 后离心保存于 2～8℃的冰箱，在 24 h 内对所有 个一级混样池均含内对照。阳性一级混样