皱边石杉内生真菌资源遗传多样性ISSr的分析.pdfVIP

2012 年全国农学博士后学术论坛论文集（福州，2012.7.12~14 ） 皱边石杉内生真菌资源遗传多样性 ISSR 分析 1,2 2,3* 4* 2,3 2,3 4* 史云峰 ，禹利君 ，黄璜 ，胥锦桦 ，朱楠楠 ，周清明 1 湖南农业大学东方科技学院，湖南 长沙 410128 ；2 国家植物功能成分利用工程技术研究中心，湖南 长 沙 410128 ；3 湖南农业大学园艺园林学院，湖南 长沙 410128 ；4 湖南农业大学农学院，湖南 长沙 410128 摘要：【背景】运用 ISSR 标记技术从分子水平探讨皱边石杉内生真菌资源的遗传多样性，建立皱边石杉内生真菌资源遗 传分化指纹图谱，为筛选可产石杉碱甲的目标菌株提供快捷的判别依据。【方法】以从皱边石杉中分离的 99 株内生真菌为 材料，建立其 ISSR 优化反应体系并分析其遗传多样性；TLC、 HPLC 检测发酵产物。【结果】优化筛选的 10 条 ISSR 引 物对皱边石杉内生真菌进行遗传多样性分析，共扩增出 3975 条清晰条带，多态性条带占 100% 。遗传相似系数为 0.59~0.96，在 0.64 水平，可分为 11 类；在 0.67 水平，第 Ⅰ类又可分为 5 个亚类。UBC868 对 13 号菌株及皱边石 杉基因组 DNA 扩增，在 500 bp 、200 bp 均具有清晰的扩增条带，发酵产物经 TLC/HPLC 检测，发现 13 号菌株与宿主 植物皱边石杉一样可生产石杉碱甲。【结论与意义】皱边石杉内生真菌资源遗传多样性高，遗传距离较远，遗传基础较宽， 与 13 号菌株同属一类的内生真菌可作为石杉碱甲生产的潜力菌株进行重点筛选和诱变。 关键词：皱边石杉；内生真菌；ISSR 标记；遗传多样性；石杉碱甲 Genetic Diversity for Endophytic Fungi of Huperzia crispata Analyzed by ISSR Markers SHI Yun-feng1,2, YU Li-jun2,3*, HUANG Huang4*, XU Jin-hua2,3, ZHU Nan-nan2,3, ZHOU Qing-ming4* （1 College of Orient Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China ；2 National Research Center of Engineering Technology for Utilization of Functional Ingredients from Botanicals, Changsha 410128, China；3 College of Horticulture and Gardening, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China ；4 College of Agricultural, Hunan Agricultural Univers