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AG砒cuLTuRALSCIENcEs 39
湖北农业科学 HuBEI No．6，2005
文章编号：0439—8114(2005)06—0039—03
苏云金杆菌99—11菌株培养条件的研究
陈在佴，吴继星，张志刚
(湖北省生物农药工程研究中心，武汉430064)
摘要：采用液体摇瓶培养法，对Bti99—11茵株培养条件进行了研究。结果表明：B廿99—11液体培养的
cucl。O．1。Fecl30．1．添加剂I号1。添加剂Ⅱ号2。采用500mL三角瓶裴量25mL、230r-min_’为最佳培
养条件；40t发酵罐发酵试验，发酵生物效价迭到302ITu-¨L_1。
关键词：苏云金杆菌99—11(Bn99一11)；液体摇瓶培养；生物效价
中图分类号：s476 文献标识码：A
蚊虫属双翅日昆虫，遍布全球。它骚扰人们的 1材料和方法
工作睡眠，传播危害人类生命和健康的多种疾病，
1)菌株：苏云金杆菌99—11为作者分离并保藏
包括疟疾、丝虫病、登革热、黄热病、脑炎等。每年有
的菌株；对照菌株(苏云金杆菌以色列亚种H14)为
成千上万的人因蚊媒疾病而丧失劳动力、残废甚至
本实验室保藏的标准菌株。
死亡。20世纪50年代中期，世界卫生组织曾在全球
2)培养基：④斜面培养基(g·L。)：牛肉膏5，蛋
发起“消灭疟疾规划”，大量使用DDT等化学农药。
白胨10，葡萄糖2，Nacl5，琼脂22，pH值6．8—7．0。
尽管在某些地方取得了成效，但因为抗药性的产
②单一碳源培养基’(g·￡。1)：碳源(玉米淀粉，土豆
生，并未达到从根本上消灭蚊虫的目的。由此，科学
粉，红薯粉，玉米粉，糖蜜，工业葡萄糖)25，KH2P0。
家们提出了蚊虫综合防治策略“]。
3，CaCl22，ZnCl2O．3，FeCl3O．5，MgCl20．05，CoCl2
苏云金杆菌以色列亚种(B∞iffw眈““，潮em诂
Israelensis，简称Bti)是当前应用最为广泛的杀蚊微
(g·L_1)：氮源(黄豆饼粉，棉子饼粉，花生饼粉，工业蛋
生物。Bti主要杀虫活性物质是伴孢晶体蛋白毒素，
白胨鱼粉，蚕蛹粉，酵母粉)27，KH2p043，K2}IP043，
I
伴孢晶体蛋白由cry4Aa、cry4Bb、cryllAa和cry
CaCl2
2，ZnCl20．5，FeCl3O．5，CoCl20．05，CuCl2O．05，
Aa基因所编码的28、72、128和134KDa蛋白多肽
添加剂I号3。
组成，通过这些蛋白多肽的协调作用产生对蚊幼孑
3)摇瓶培养与40t大罐发酵：按不同培养基配
孓的毒性反应日。作者分离获得一株对蚊幼孑孓高
方配制，采用500mL三角瓶装量25mL(溶解
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