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第八届全国肝脏疾病临床学术大会
肝癌组织乙型肝炎病毒复制转化生长因子一p1
和胰岛素样生长因子-II表达的关系分析
南通大学附属医院临床医学研究中心(226001)
吴玮姚登福严晓娣陈洁蔚丹丹
【摘要】 目的分析肝癌组织HBV复制与转化生长因子(TGF)一p1和胰岛素样生长因子(IGF)一II表达间的关系。方法
l采用免疫组织化
以自身对照法收集人HCC组织及非癌组织,以生物素标记的HBV-DNA探针检测肝癌组织中HBV—DNA
肝
学方法,检测组织中TGF—D1和IGF—II的表达;分析TGF—p1和IGF-II表达与HBV复制间的临床病理学关系。结果
癌组织中TGF—D
非癌组妒0.01)。HCC的癌灶组中TGF—B
DNA阳性组显著高于HBVDNA阴性组。结论
目无关垆0.05);TGF—p1和IGF-II表达与HBV复制显著相关,且HBV
肝癌组织中TGF—p1和IGF-II过度表达,且与HBV复制和肝癌的分化程度有关。
1; IGF-II;免疫组织化学;HBV-DNA
【关键词】肝细胞癌;TGF-p
肝癌(HCC)是由病毒、化学致癌物等多病因作用,因癌基因或癌相关基因激活、抗癌基因失活或胚胎期某
些酶基因重新复活等诸多因素引起肝细胞生长失控而致癌变,经启动、促进、演变多阶段的发病过程,其中基
1是细
因的调控和表达、多种生长因子的活陛等均与肝癌的发生、发展密切相关[1-21。转化生长因子(TGF)一p
1和IGF一Ⅱ
患者中绝大多数伴乙型肝炎病毒(HBV)感染,但在HBV持续感染至肝癌发生过程中,TGF—D
l
表达与HBV感染间的关系尚不清楚。为此,本文以自身配对法收集肝癌及非癌组织,分析肝组织中TGF—D
和IGF-II的表达与肝组织中HBV复制、肝癌分化程度、浸润与否等临床病理学特征之间的关系。
材料和方法
1.肝癌组织留取及诊断标准:按自身配对法收取南通大学附属医院肝癌患者(男24例,女6例)术后新
鲜组织,分别留取癌灶、非癌组织(距癌灶边缘5
保存。其中原发懦30例(含5.0
所有病例均有完整随访资料,按全国肝癌防治协作组制定的标准核实诊断。
2.免疫组织化学分析方法:兔抗人IGF一Ⅱ或TGF—Dl的多克隆抗体及S—P免疫组化试剂盒均购自福州
迈新生物技术开发公司。肝组织标本经40
织学观察。在非癌组织及HCC组织中的IGF一Ⅱ或TGF—D1表达,均采用免疫组织化学S—P法,石蜡标本4
mol/L
“m厚连续切片经DAB显色,苏木素复染,无水乙醇脱水、中性树胶封片。以0.01
别替代—抗、二抗和SP试剂作为每次染色的阴性对照,已知表达IGF-1I或TGF—D1的癌组织作阳性对照。
3.TGF-p1和IGF-tl阳性判断标准:肝组织中显示棕黄色颗粒为表达阳性。TGF-D
达强度,以阳性细胞数≥10%作为阳性判断标准,进而根据阳性细胞百分率分为弱阳性(+),阳性细胞数为
10%~25%;阳性(++),阳性细胞数为26%~75%;强阳性(+++),阳性细胞数75%。
4.肝组织HBVDNA检测:取肝癌的癌灶组织,经10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,组织切片,脱蜡水化,
min,脱水,37℃温箱烘干,加生
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