GABA茶中γ-氨基丁酸的TLC测定及提纯研究.pdfVIP

维普资讯 氨基酸和生物资源 2008，30(3)：11～15 AminoAci出 ＆BioticResources GABA茶中^y一氨基丁酸的TLC测定及提纯研究 黄亚辉 ，曾 贞 ，郑红发 ，黄怀生 (1华南农业大学园艺学院，广州，510642；2湖南省茶叶研究所，长沙，410125) 摘要：本文对 GABA茶中有效成分 一氨基丁酸的薄层扫描(TLC)检测以及提取、分离、纯化进行 了研究，结果表明：正丁 醇 ：醋酸 ：水体积比为4 ：1：1展开剂分离效果较好，Rf值为0．46。采用双波长扫描法检测，扫描波长分别为AS=515 nm，AR=680nm，检测线性范围：0．5IxL～15uL，样品平均回收率为98．75％。采用水提取法 比乙醇提取法 一氨基丁酸含 量提高20％左右，732阳离子树脂对 一氨基丁酸的静态最大吸附量为32．9mg·g～，1h内其吸附速度较快，达吸附量的 70％。样液 pH值 、流速等因子对树脂的吸附效率有影响，当pH值为3．0，流速3ml·min 时，树脂的吸附量达到最大值。 采用柠檬酸缓冲液和 NH ·H：O进行洗脱 ，当pH为8．0～9．0时，一氨基丁酸洗脱率达 94．68％。 关键词：一氨基丁酸；测定 ；提取 ；分离；纯化 中图分类号：Q503 文献标识码：A 文章编号：1006—8376(2008)03—0011一O5 ^y一氨基丁酸 (GABA)广泛存在于哺乳动物脑 1．1 实验材料与试剂 和脊髓中，是一种重要的抑制性神经传递物质，具有 GABA茶(研究者 自制，一氨基丁酸质量分数 降血压、抗惊厥、镇痛和改善记忆等生理活性 。 为0．15％以上)，粉碎，过20目筛备用； 一氨基丁 最新研究表明还有调节激素分泌，改善更年期综合 酸标准品：江苏三兴生化试剂厂；阳离子交换树脂： 症，促进酒精代谢 以及高效减肥等活性_2-4]。日本 南开大学化工厂；薄层层析硅胶G(青岛海洋化工有 茶学研究者首先发现，将茶鲜叶经过一定时间的厌 限公司)。其它试剂均为分析纯。 氧处理会产生大量的 一氨基丁酸 ，以此加工成的 1．2 主要仪器设备 绿茶富含 一氨基丁酸 (含量一般在0．15％以上)， CAMAGTLCSCANNER3；5 L微量点样针；点 并且将这种茶命名为 GABA茶 J，经试验证实这种 样毛细管 (5 L)；旋转蒸发仪 RE52—98(上海亚荣 茶具有明显的降血压效果。我国GABA茶研究起 生化仪器厂)；SHB一111循环水式多用真空泵 (郑州 步较晚，林智等对其降血压机理、2，4一二硝基氟苯 长城科工贸有限公司)；AB204一S电子天平；艾科 柱前衍生HPLC测定法以及不同厌氧处理的效果进 浦分析型实验室纯水机 (重庆颐洋企业发展有限公 行了研究 。“’；黄亚辉等采用邻苯二甲醛 (OPA)柱 司)；p‘3．0cm，高50cm玻璃层析柱。 后衍生HPLC法对 一氨基丁酸进行了测定，研究 1．3 实验方法 设计干法和湿法工艺，加工出 一氨基丁酸含量达 1．3．1 一氨基丁酸的提取 0．172％一0．350％的 GABA茶，其 中湿法工艺获得 1．3．1．1水提取法 国家发明专利(Z8)，并对 GABA茶的临 称取粉碎 GABA茶 50g 加入去离子水200 床降压效果 以及加工过程中各种游离氨基酸的 mL_ 0℃水浴浸提 2h一过滤一滤渣再用 250mL 变化动态进行了研究 ¨ “J。^y一氨基丁酸对人体具 去离子水60~C水浴提取3h一过滤一合并两次滤液 有许多积极的生理意义，然而对其提纯方面的研究 减压浓缩至50mL(80~C)一浓缩液中加2倍体积 却不多见。本文对TLC测定方法以及提取、分离、 95％乙醇醇沉_÷静置2h一过滤一去乙醇得提取液， 纯化诸方面开展摸索，旨在为 ^y一氨基丁酸成分的 点样 ，薄层检测。 深度利用提供参考。