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大肠杆菌发酵生产重组人源抗.pdf
卷 期 生 物 工 程 学 报
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年 月
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大肠杆菌发酵生产重组人源抗!#$ %’
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安 峰 陈玉川 范列英 韩焕兴
! (中山大学中山医学院法医病理学教研室,广州B!$$6$ )
# (第二军医大学长征医院临床免疫中心,上海#$$$$% )
摘 要 在CDE#$$$ 发酵罐中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒FGHIJ KGL E,M 的4NO!$ 大肠杆菌,生产
人源抗 ,为批量生产作准备。在发酵过程中,控制溶氧 以上,温度 ,在基础培养基内生长 后,
1KGL E,M %$ P %7 Q 3 ?
补加以甘油为碳源的补料,继续生长到 ,加入阿拉伯糖,至终浓度为 , 诱导表达 ,收集菌体,纯化制
? $ )$# P %$Q B?
备目的蛋白。利用 方法检测 抗原性, 方法检测生物学活性。 发酵结束后,菌体密度最终
R5L@5/- M(’@ E,M I’@ M(’@ !3?
达 ,纯化所得蛋白大约占菌体总蛋白的 ,含量为 。以重组质粒 ,大肠杆菌 表达
2J D 2 P 6$9J D FGHIJ KGL E,M 4NO!$
生产的人源抗1KGL E,M 为可溶性具生物学活性的蛋白,与包涵体表达相比避免了变性、复性这一复杂过程,发酵罐
表达比率与摇瓶相比没有降低,表达量达6$9J D 左右,为大批量生产作了准备。
关键词 人源抗1KGL E,M,分批补料发酵培养
中图分类号 文献标识码 文章编号 ( )
SBB3 H !$$$1%$2! #$$% $!1$$671$B
特异性抗体治疗是最具特异性,最有应用潜力 提供,重组质粒 图谱见图 。它带有
FGHIJ KGL E,M !
的治疗手段,近年来已有近百余种人源化抗体在前 氨苄青霉素抗性基因,以及编码人源抗KGLH 抗体
期临床或临床试用,它在多种疾病治疗中发挥着重 重链 段及 轻链的基因,分别受两个阿拉伯糖启
EW
[]
要作用! ,本实验用
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