手术及放疗后复发乳腺癌组织中MVD与HIF1α表达的临床意义.pdfVIP

生堡墼墅垦堂皇堕塑壁查塑!芏!!旦整墅鲞筻!塑!坐!曼四i型丛生塑生里竺!坐!丝堕，!些垄，盟!! ·临床研究· 手术及放疗后复发乳腺癌组织中MVD和HIFI—a表达的临床意义 梁军岳麓沈赞李鹤成黄伟翼 实体肿瘤的生长依赖于肿瘤血管生成。诱导衄管生成 下(氧含量0．2％)培养6 的能力是恶性肿瘤生长、浸润和转移的前提之一。缺血诱导 inductblefactor 印迹小于05的设为低表达，等于或高于05的设定为高表 因子1一口(hypoxia 1q，HIFl．a)是最近发现的一种 重要的促肿瘤生长因子和血管生长因子，细胞生物学和动物 达“]。②MVD分析：将胞浆呈黄染的、与周围其他组织有明 研究表明其表达与肿瘤的发生及生长有关”引。微血管密度 显界限的内皮细胞或内皮细胞串(无论有无管腔)，计数为1 (microvesseldensity．MVD)是反映肿瘤血管生成的～种定量指个血管。首先在40倍光镜下扫描整个切片，寻找高血管密 度区(即“热点”)．在热点区域计数5个100倍视野下的血管 标，与肿瘤的预后有关。4。1。HIFI—a在经过手术及放疗后的 复发乳腺癌中的表达情况目前少见报道，本研究对复发乳腺 数目，选取其中最大的3个数值，取其平均值作为肿瘤组织 微血管密度MVD…。MVD≥203为微血管高密度，MVD 癌组织中HIFl一a表达和MVD与临床病理参数和预后的关系 进行了初步探讨。 203为微血管低密度”…。 一、材料和方法 5统计学处理：采用SPSS统计软件进行分析。 1．资料：选择我院肿瘤科1992至1999年收治的经过手二、结果 术及放疗后的复发乳腺癌患者68例，取复发的癌组织，甲醛 1 60，P( 固定、石蜡包埋、5；an切片，常规HE染色，病理诊断为癌组HIFI-a表达与病理分级呈明显正相关(T2=10 o．01)，H1FI—a表达与各指标的关系见表1。 织。患者平均年龄52岁(33～78岁)，绝经前发病3l例，绝 经后发病37例。争部病例均经过乳腺癌改良根治术及放射 表1 HIFI—a表达与临床病理学特性问的关系 治疗(5000 eGy／5周)。平均随访时间为43个月(12—72个 月)，4例失去随访，随访率941％。按照国际抗癌联盟提出 的TNM分期法(1988)进行手术分期和病理分级，组织学分型 采用1988年国际病理学会组织学分型标准进行“]。其中提 润性导管癌33例占485％，浸润性小叶癌29例占426％，髓 样癌3例占4．4％；其他类型3例占44％。手术病理分期均 为Ⅱ期；病理分级c．级28例占412％，G2级28例占 41．2％，c3级12例占17．6％。 2方法：①免痉组化(IHC)染色，用S-P免疫组化法 (过氧化酶标记的链霉菌素抗生物素蛋白)染色，具体方法参 见试剂盒说明；②Westernblot检测HIFI．a表达，总蛋白质的 提取、SDS／PAGE电泳、转膜等步骤按分子克隆的方法进行． 检测采用Amersham公司的ECL试剂盒提供的标准进行。 3试剂：小鼠抗人H1F1一n单克隆抗体(美国SanDiego公 司)，兔抗人多克隆Ⅷ凶子相关抗原抗体和sP即用型试剂盒 (均为美国ZYMED公司产品)。Westernblot的ECI．检测试剂 盒及PVDF膜购于美国Amersham公司。其他试剂均为国产 或进口分析纯。 4结果判定：①HIFl一a表达：blot印迹定量用分子动力 光密度仪和图像定量(version1．o)软件分析。以在缺氧条件 作者单位：266003青岛大学医学院附属医院肿瘕中心(梁军、 岳麓)；香港大学医学院癌症中心