凝胶渗透色谱法检测淀粉酶解产物相对分子质量及其分布.pdfVIP

维普资讯 第 26卷第 5期 河南工业大学学报 (自然科学版) Vo1．26，No．5 2005年 10月 JournalofHenanUniversityofTechnology(NaturalScienceEdition) 0ct．2005 文章编号 ：1673—2383(2005)05-0056-05 凝胶渗透色谱法检测淀粉酶解产物 相对分子质量及其分布 刘艳群 ，刘钟栋 ，罗宣德2，肖付刚 ，秦 红2 (1．河南工业大学 粮油食品学院，河南 郑州450052；2．中国医药研究开发中心有限公司，北京 102206) 摘要：运用普适校正原理，不需要 Mark常数 K、a值，使用示差折光检测仪及凝胶渗透色谱系 统，直接测定了葡聚糖的相对分子质量及相对分子质量分布 ，优化 了色谱操作条件 ，证 明凝胶 渗透色谱是监控淀粉酶解反应程度的一种有效手段 ． 关键词 ：凝胶渗透色谱法；淀粉 ；葡聚糖 ；相对分子质量；相对分子质量分布 中图分类号 ：TS201．2 文献标识码 ：B 导 ，右旋糖苷注射液的过敏反应与其相对分子质 0 前言 量增大及分布不均匀有关 ．而 中国药典 自2000年 版起改用相对分子质量与相对分子质量分布测定 淀粉是植物贮备 的营养物质 ．淀粉制品(淀粉 法对产品质量进行控制 ．其收载 了70(重均相对 糖 、变性淀粉 、氨基酸、酒精 、有机酸 、有机溶剂等) 分子质量 =64000～76000)，40( =32000 广泛应用于食品工业 、医药工业 、造纸工业 、纺织 ～ 42000)，20(M =16000～24000)等 3种规格 工业、去污、浆洗衣物等行业…．不同的应用对于 的右旋糖苷_4J．因此寻找一种能够快速 、准确测定 淀粉的性质有不 同的要求 ，其 中相对分子质量范 淀粉降解产物相对分子质量的方法来衡量产品质 围是对产品进行评价 的一个重要指标 ．酶解是一 量是非常重要的． 种常用的淀粉降解方式 ，是个不均匀的降解过程 ， 凝胶渗透色谱法(GPC)测定多糖相对分子质 产物的相对分子质量分布极不均匀 ．因淀粉在醇 量因具有快速 、高分辨率和重现性好 的特点已被 类溶液中的溶解性随着相对分子质量增大而 降 广泛采用_5J．GPC是一种使流动相与控制孔径分 低 ，据此可用不同浓度的乙醇来分离 (常用 4级或 布的固定相接触，从而使溶质按分子体积大小分 5级)．但其 以往相对分子质量测定是采用测定特 离的色谱方法_6J．因凝胶色谱柱 中多孔填料的内 性粘度推算出来的，是一个均值，不能真实反映产 部和表面有着各种大小不同的孔洞或通道，高聚 品中的相对分子质量及其分布特征 ． 物溶液随着流动相溶剂流经色谱柱时，大小不同 在过去的20a中，有关糖 的化学和生物学研 的溶质分子渗透到凝胶孔内部的几率是不同的， 究取得了长足进步 ，也重新唤起 了药学家对该类 分子链短的，扩散进入孔的机会多，在柱中保留时 化合物的兴趣 ，使得基于糖类 的药物研究得到了 问长 ，相反 ，长链分子扩散进入孔的机会少 ，在柱 较大发展 2J．众所周知 ，临床上对窄相对分子质量 中保 留时间短 ．因此 ，溶质 以长链分子在前 ，短链 分布范围的葡聚糖有很高需求 3J．例如 Ring曾报 分子在后的顺序从柱 中淋洗 出来，以谱带形式进 入检测器进行检测 ．本文 旨在采用示差折射检测