柔嫩艾美耳球虫卵囊免疫后鸡盲肠扁桃体GM-CSF基因表达的动态变化.pdfVIP

维普资讯 畜牧兽医学报 2008，39(7)：950954 ActaVeterinariaetZootechnicaSinica 柔嫩艾美耳球虫卵囊免疫后鸡盲肠扁桃体 GM—CSF基因表达的动态变化 徐 赓 ，王彩霞 ，王黎霞 ，安 健 卜，李卫东 (1．北京农学院动物科学技术系，北京 102206；2．北京昌平城 区动物卫生防疫站 ，北京 102200) 摘 要 ：为柃测和评价鸡粒细胞一巨噍细胞集落刺激因子 (ChGMCSF)在抗球虫免疫过程巾的作用 ，以RTPCR技 术从鸡阿肠扁桃体 中克隆获得 了ChGM CSF编码基 因的开放 阅读框 (()RF)，其长为 435bp。将试验鸡随机分为 对照绀和试验组 ，试验组于 l2、22日龄时用 E．tenella孢子化卵囊进行免疫 ，分别于设定时间每次取 5只鸡采集盲 肠扁桃仆 ，以鸡 p—actin为参照建立半定量 RT—PCR方法检测ChGM—CSF的表达动态。结果表明，在第 1次免疫后 的第 l天(13f_j龄，Po．05)和第 2次免疫后的第 7天(29口龄 ，P％0．01)，试验组ChGM—CSF的表达量显著高于 对照组 ；_住第 1次免疫后的第 9天(2l口龄)和第 2次免疫后 的第 3灭(25日龄)ChGM—CSF的表达量显著低于对 照组 (P％0．01)。奉研究提示 ChGM—CSF参与 了鸡体 的抗球虫感染过程 ，为进一步探讨 ChGM CSF的生物学活 性及作为鸡球虫病基因工程疫苗佐剂的研究奠定基础 。 关键词 ：鸡 ； 肠扁桃体 ；GM—CSF；半定量 RT—PCR 中图分类号：$852．723 文献标识码 ：A 文章编号 ：O3666964(2008)O7一O95O—O5 ExpressingProfilingofGM—CSF GeneinCecalTonsilofChickens VaccinatedwithEimeriatenella Oocysts XU Geng，WANG Cai—xia ，WANG Li—xia ，ANJian ，LIWei—dong (1．FacultyofAnimalScienceandTechnology。BeijingAgricultural College，Beijing102206，China；2．ChangpingAnimalHealth andDiseaseControlStation，Be ing 102200，China) Abstract：Inordertoevaluatetheeffectsofchickengranulocytemacrophage colonystimulating factor(GM CSF)ontheanticoccidialimmunity，theORFofChGM CSF wereclonedfrom chick— encecaltonsilusingRT—PCR withapairofspecificprimersdesignedfrom thereportedsequence inGenBank．Thefull—lengthofChGM CSF ORFis435bp．Thesemi—quantitativeRT PCR using chickenG—actinasinnerreferencefordetecting theexpressionofChGM—CSF wasfurtherdevel opedandthenwasusedfordetectingtheexpressingpatternsofChGM—CSFinchickensvaccinated withsporulatedoocystsofE．tenellaat12and 22day—old．Ourresultsindica