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第七章 细胞培养和反应动力学 反应动力学的概念 主要是研究各种环境因素与微生物代谢活动的之间的相互作用随时间而变化的规律。用数学的模型定量地描述生物反应过程中影响细胞生长、基质利用和产物生成的各种因素。有关的研究可为生物反应过程的控制、小型试验数据的放大和提高反应过程的产物得率等提供理论依据。 细胞培养分类 按照培养的方式分三种类型: 分批培养(batch culture) 连续培养(continuous culture) 补料分批培养(fed-batch culture) 第一节 分批培养(batch culture) 分批培养又称分批发酵,是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后,接入少量的微生物菌种进行培养,使微生物生长繁殖,在特定的条件下只完成一个生长周期的微生物培养方式。分批培养是一种非稳态的培养方法。 微生物的生长曲线 在分批培养过程中,随着微生物和底物、代谢 产物的浓度等的不断变化,微生物的生长可分为 停滞期、对数生长期、稳定期和死亡期四个阶段。 1)停滞期(适应期)lag phase 停滞期是微生物细胞适应新环境的过程。微生物 细胞从一个培养基被转移至另外一个培养基中, 细胞需要有一个适应过程,在该过程中,系统的 微生物数量并没有增加,处于一个相对的停止生 长的过程。 接种物的生理状态和浓度是停滞期长短的关键。 2)对数生长期(exponential phase) 处于对数生长期的微生物细胞的生长速度大大加快,单位时间内细胞的数目或重量的增加维持恒定,并达到最大。此阶段生长比速为常数。为缩短适应期,常采用对数期的培养物做接种物。3)稳定期(stationary phase) 当细胞停止分裂,或细胞生长与死亡的速率达到平衡时便出现稳定期。在微生物生长的稳定期,细胞的重量基本维持稳定,但活细胞的数量可能下降。4)死亡期(decline phase) 培养基中营养耗尽,代谢产物大量积累,细胞繁殖趋于停止,而死亡细胞越来越多,即活细胞数量显著下降。 * *
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