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昆 虫 学 报 Acta Entomologica Sinica , April 2005 , 48 (2) : 305 - 309 ISSN
美洲大蠊主要变应原蛋白的质谱鉴定与分析
1 ,2 1 2 1 3 3
胡 川 , 刘志刚 , 李金生 , 韩庆国 , 林立丰 , 阴伟雄
( 1 深圳大学生命科学学院微生物基因工程重点实验室 , 广东深圳 518060 ;
2 江西医学院基础医学部 , 南昌 330006 ; 3 广东省疾病预防控制中心昆虫研究所 , 广州 510300)
摘要 : 为了建立美洲大蠊 Periplaneta americana 变应原蛋白的质谱鉴定方法 , 我们将美洲大蠊粗浸液通过 DEAE52 离子交换
层析、Sephacryl S200 凝胶过滤层析等分离步骤得到纯化的 74 kD 蛋白 , 对纯化前后的该 74 kD 蛋白分别进行 SDSPAGE 及凝
( ) (
胶内胰酶酶切 , 再经液相色谱电喷雾串联质谱 HPLCESIMSMS 在线联机分析 , 所得质谱数据进入网站 http : www.
matrixscience. com) 进行 Mascot 检索比对。通过对两者质谱鉴定结果的比较来评估美洲大蠊天然主要变应原蛋白的纯化效
果。结果表明 , 纯化蛋白经 HPLCESIMSMS 鉴定是美洲大蠊主要变应原蛋白 ; 离子交换层析等纯化步骤可以去除同一分子
( )
量的杂蛋白 如卵黄原蛋白 , 从而获得较好的鉴定结果。我们首次成功地运用质谱建立起变应原蛋白的新鉴定方法。
关键词 : 美洲大蠊 ; 液相色谱 ; 电喷雾; 串联质谱; 变应原 ; 鉴定
中图分类号: Q965 文献标识码 : A 文章编号 : (2005)
Identification of the major allergen in Periplaneta americana by HPLCESIMSMS
1 ,2 1 2 1 3 3 (
HU Chuan , LIU ZhiGang , LI JinSheng , HAN QingGuo , LIN LiFeng , YIN WeiXiong 1 Shenzhen Key
Laboratory of Genetic Engineering , College of Life Sciences , Shenzhen University , Shenzhen , Guangdong 518060 ,
China ; 2 Department of Biochemistry , Jiangxi Medicial College , Nanchang 330006 , China ; 3 Institute of Entomology ,
Guangdong Provinci
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