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体外培养和早期胚胎培育.ppt
试管婴儿 1978年7月26日,世界首例试管婴儿“路易斯.布朗”在英国诞生,现已成为母亲。 转基因试管牛 我国首例转基因试管牛“滔滔”于1999年2月19日在上海诞生 试管动物技术 =体外受精+早期胚胎培养+胚胎移植 快速繁殖动物优良品种 目的: 技术手段: 体外受精和早期胚胎培养和胚胎移植 体外受精的主要步骤 卵母细胞的采集 精子的获取 受精 1.卵母细胞的采集和培养 对不同动物,采取卵母细胞的方法不同: (1)对实验动物:用促性腺激素处理 (2)对大家畜或大型动物:从废弃卵巢中采集卵母细胞或活体采卵 采集的卵母细胞都要在体外经人工培养成熟 2.精子的收集和获能 1)收集的方法: 假阴道法、手握法和电刺激等 2)获能处理: 培养法:把精子放入获能液(类似于雌性动物体内输卵管的液体环境)中。 (啮齿动物、家兔和猪) 化学法:把精子放入一定浓度肝素或钙离子载体A23187溶液中。 (牛、羊等家畜) 3.受精 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 二、胚胎的早期培养 受精卵 胚胎 受体 目的: 发育培养液: 移植: 不同生物有不同的适宜阶段 检查受精状况和受精卵发育能力 成分: 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等. 把受精卵培育成早期胚胎后移植到另一雌性动物体(受体)内 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 胚胎移植 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 保存剩余的卵子和精子的方法是什么? 第三节胚胎工程的应用及前景 胚胎移植——其他技术的最后工序 胚胎分割——克隆的方法之一 体外生产胚胎 胚胎干细胞的应用 胚胎移植将雌性动物体内的早期胚胎(囊胚以前8-16个细胞以后),或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。 胚胎移植的应用 基因工程生产转基因动物 ——目的基因导入受精卵 克隆动物的生产 ——重组细胞 优良种牛配种后(试管动物)的生产 ——具优良基因的受精卵 在体外外培育成早期胚胎后移植 胚胎移植的生理学基础 供体受体动物发情排卵后生理状态相同 早期胚胎不与母体有直接联系(游离),易获取 移植胚胎不会被母体作为抗原 胚胎的基因型不会因为移植而变化 胚胎分割 与克隆动物(核移植技术产生的)的比较 操作对象:细胞核与去核卵母细胞 胚胎(桑葚胚或囊胚) 操作技术:显微操作技术 操作简要过程:将体细胞细胞核植入去核卵母细胞内 均等分割胚胎细胞团 产生动物的特点:与细胞核供体性状极其相似 产生类似于同卵双胞胎的后代 另外:克隆动物是无性生殖的产物之一克隆动物不等于克隆的动物(包括胚胎分割及核移植技术产生的动物) 胚胎干细胞 早期胚胎(原肠胚期之前如桑葚胚,囊胚期的内细胞团)或原始性腺中分离的一类细胞 * * * * * * * * * * * *
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