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高效液相色谱法分离测定土壤中的多环芳烃 谢重阁 杨志勇 （中国科学院林业土壤研究所，沈阳） 提〔要〕本文提出高效液相色谱法分离测定土壤中的多环芳烃。方法简便，快速，基本过程 是将土壤样品用二氯甲烷索氏提取，提取液浓缩后，经硅酸镁-微细硅胶薄层纯化，以除去色素、 极性物及其它杂质。薄板在254nm紫外光下观察，收集荧光带区域内的吸附剂，用二氯甲烷 洗脱，浓缩后进行高效液相色谱分析。该法对几种代表性多环芳烃的回收率为75.0-100％。 用苯并 a（）芘为代表物作了高效液相色谱法与荧光法比较，结果也很近似。 土壤中的多环芳烃 P（AH）来源于天然 1．日立635高效液相色谱仪。2．紫 的和人为的。天然源产生的PAH，如生物 外线分析仪：254nm或365nm。 合成、火山爆发和天然燃烧散发出的PAH， 二（）试剂与材料 由于地球的自净力，不至于在环境中积累。 1．二氯甲烷，30-60℃石油醚，苯， 然而人为源—废水、废渣、烟尘导致PAH在 甲醇，乙腈，均为分析纯。2．硅酸镁 硅（ 环境中的积聚，是人们所观注的。特别有机 镁型吸附剂）：浙江黄岩硅胶厂。3．微细 物燃烧，660-740℃1〔〕是PAH自行合成的最 硅胶：300目，浙江黄岩硅胶厂。 4．多环 适温度。在燃烧中有机物先裂解成小的、不 芳烃标准：苊、蒽、芘、 、 、菲、苯并 稳定的 “碎片”或 “根”，这些 “碎片”或 a（）芘。苯并 e（)芘、苯并 a（）蒽、荧蒽、 “根”进而结合成大的分子—PAH，它们附 9，l0-二甲基-1，2-苯并蒽、苯并 g（hi） 、20- 着在10—100微米的颗粒上，最终降于土壤 甲基胆蒽等均为购买试剂。分别用苯溶，配 与水体。因此，对土壤PAH的分离测定， 成2毫克／毫升的原液。使用前再用苯稀释。 在一定程度上能反映大气中PAH的分布状 三（）操作过程 况。 1． 样品处理：称取2:5克 视（PAH含 目前，国内外测定大气、水体、食品中 量而定）阴干，粉碎，通过0.5毫米筛孔的 的PAH报道较多2〔-6〕，而对土壤 PAH的 土样，装入经二氯甲烷回流过的滤纸筒中， 分离测定报道尚少。1980年，我们曾建立了 在索氏提取器内，用二氯甲烷回流提取6-8 土壤中PAH的荧光法7〔〕，该法虽然灵敏 小时，蒸去二氯 甲烷，残 留物用薄层纯 度高，而且对高效液相色谱(HPLC)难以分 化。 离的苯并 e（）芘B（eP）与 、 与苯并 a（）蒽 取硅酸镁与微细硅胶各10克，用乙醇调 两对异构体得到了良好的分离效果，但该法 成糊状，可涂8.5×13厘米的板8-10块，在 对大批量样品测定较繁琐。鉴于上述原因， 室温下风干约4小时即可使用。将残留物用 我们进一步提出土壤中PAH的HPLC法。 环己烷溶后带状点板，带宽约2毫米，距样 HPLC法操作简便，节省试剂，适于大批量 品1.5厘米点PAH标准，在适宜的层析缸 土样的常规分析，便于推广。 内，以环己烷—石油醚 2（：1）为展开剂，于 暗处展开约10分钟，待展开剂前沿距顶端 实 验 方 法 1—2厘米时，取出板，在254nm紫外光下观 一（）仪 器 察，可见7-8个荧光带 如（空气湿度过高， 分带不清，此时可将板预先在40-45℃干燥 表 1 PAH全过程回收实验结果 10分钟，再进行展开，效果最好），收集荧 光带区域内的吸附剂，用二氯甲烷洗脱5-6 次，洗脱液约10-15毫升后，赶去洗脱剂， 残留物备色谱分析。