基质辅助激光解析电离质谱与电喷雾质谱共同快速确证达托霉素结构.pdfVIP

第43 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第1 期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2015 年1 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 63 ~68 DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.140385 基质辅助激光解析电离质谱和 电喷雾质谱共同快速确证达托霉素结构 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 黄亚娟 摇 张拓 摇 韩治国 摇 孟晓光 摇 宋纯艳 3 *1,2,3 *1,2,3 刘曙晨摇 郑俊杰 摇 魏开华 1(北京正旦国际科技有限责任公司,北京 102206) 2(北京蛋白质组研究中心,蛋白质组学国家重点实验室,国家蛋白质科学中心(北京),北京 102206) 3(军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京 100850) 摘摇 要摇 运用基质辅助激光解析电离鄄飞行时间串联质谱(MALDI鄄TOF/ TOF MS)和电喷雾鄄四级杆鄄飞行时间 质谱(ESI鄄Q鄄TOFMS)快速确证环脂肽达托霉素的结构。 首先,ESI检测达托霉素相对分子量为1619.7107,与 理论值偏差0.0007。 选择其双电荷峰m/z 809.848作为母离子进行ESI 串联质谱(MS/ MS)测定,成功匹配了 达托霉素环外氨基酸序列 C H CO鄄Trp鄄Asn鄄Asp。 其次,优化 LiOH 裂解达托霉素的实验条件,以MALDI鄄 9 19 TOF/ TOFMS监测开环效果,获得95%以上的开环样本后,分别运用MALDI和ESI进行MS/ MS测定,达托霉 + + 素开环产物的b 和y 全部被匹配,达托霉素全部氨基酸序列得到确证。 最后,对开环产物的ESI鄄MS/ MS条 件进一步优化,获得了丰富的低端碎片离子,解析了脂肪酸链结构,并绘制了脂肪酸链的裂解图。 本方法快 速、简便、准确,是确证环脂肽类化合物结构的可靠方法。 关键词摇 达托霉素;环脂肽;串联质谱;电喷雾质谱 1摇 引摇 言 达托霉素(Daptomycin)是从玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)发酵液中提取的一种新型环脂 肽类抗生素,能迅速杀死绝大部分革兰氏阳性菌,并且在体外对已呈现甲氧西林、万古霉素和利奈唑烷 [1] 等耐药性质的分离菌株具有强活性 。 达托霉素分子式为 C H N O ,含 1个亲水核及 1个亲脂 72 101 17 26 [2] 尾 ,它具有新颖的化学结构:4 位苏氨酸(Threonine ,Thr)的羟基与末尾 13位犬尿氨酸(Kynurenine, Kyn)的羧基生成酯键,形成含10个氨基酸的环肽;1位色氨酸(Tryptophan ,Trp)的N 末端与十碳脂肪 [3] 酸形成酰胺键,封闭了肽段的N 端 ;分子中包括 3 个非蛋白源的特殊氨基酸:鸟氨酸(Ornithine, [4] Orn),3鄄甲基谷氨酸